CAJ | 학술논문

以往通过基因组DNA分析,分别在高加索人和中国人中观察到少数Rh阴性个体存在RHD基因第1和第10外显子,但是该等位基因形成的具体分子机制尚有争论.分别针对RHD基因mRNA的5'-和3'-非编码区设计一对特异性引物,通过逆转录PCR(RT-PCR)和cDNA测序,分析2例RHD基因阳性(拥有第1和第10外显子)、D抗原表型阴性个体的全长mRNA/cDNA序列,同时以1例正常Rh阳性个体(CcDDee)作对照.结果正常Rh阳性个体拥有正常RHD基因mRNA,2名携带RHD基因的Rh阴性个体则均检出存在与正常RHD基因或RHCE基因转录产物相同长度、以及相同外显子构成的mRNA,但该转录子的第1和第10外显子及3'-非编码区序列与RHD基因一致,而第2～9外显子全部序列与RHCE(e)基因mRNA相同,表明2名个体均存在RHD-CE(2～9)-D融合RHD等位基因,即其RHD基因的第2～9外显子被同源RHCE(e)基因替换,导致不能编码正常RhD蛋白,形成个体D抗原阴性表型.
이왕통과기인조DNA분석,분별재고가색인화중국인중관찰도소수Rh음성개체존재RHD기인제1화제10외현자,단시해등위기인형성적구체분자궤제상유쟁론.분별침대RHD기인mRNA적5'-화3'-비편마구설계일대특이성인물,통과역전록PCR(RT-PCR)화cDNA측서,분석2례RHD기인양성(옹유제1화제10외현자)、D항원표형음성개체적전장mRNA/cDNA서렬,동시이1례정상Rh양성개체(CcDDee)작대조.결과정상Rh양성개체옹유정상RHD기인mRNA,2명휴대RHD기인적Rh음성개체칙균검출존재여정상RHD기인혹RHCE기인전록산물상동장도、이급상동외현자구성적mRNA,단해전록자적제1화제10외현자급3'-비편마구서렬여RHD기인일치,이제2～9외현자전부서렬여RHCE(e)기인mRNA상동,표명2명개체균존재RHD-CE(2～9)-D융합RHD등위기인,즉기RHD기인적제2～9외현자피동원RHCE(e)기인체환,도치불능편마정상RhD단백,형성개체D항원음성표형.