第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2006年
9期
813-817
,共5页
李美山%张成%陈松林%于美娟%张雅妮%王淑辉%熊符
李美山%張成%陳鬆林%于美娟%張雅妮%王淑輝%熊符
리미산%장성%진송림%우미연%장아니%왕숙휘%웅부
基质干细胞%腺病毒%绿色荧光蛋白%C2C12%MyoD%Myogenin
基質榦細胞%腺病毒%綠色熒光蛋白%C2C12%MyoD%Myogenin
기질간세포%선병독%록색형광단백%C2C12%MyoD%Myogenin
目的:研究重组腺病毒(Ad)对骨髓基质干细胞(MSCs)的转染,以及绿色荧光蛋白(GFP)和成肌调节因子MyoD和Myogenin在MSCs中的表达. 方法:用差速贴壁法体外培养大鼠MSCs,并用流式细胞仪(FCM)检测其表面标志;对构建有绿色荧光蛋白的重组腺病毒(Ad-GFP)进行扩增和鉴定,并转染MSCs;用RT-PCR检测MyoD和Myogenin在转染后MSCs中的表达;将MSCs与C2C12成肌细胞共培养,诱导前者的分化,并用免疫荧光检测MyoD的表达. 结果:FCM检测证实,在MSCs的表面标志中CD11b和CD45阴性,而CD29和CD44阳性;随着Ad-GFP感染复数(MOI)的增加,转染效率也相应提高,但在MOI大于100后,MSCs开始出现病变;RT-PCR结果提示MyoD和Myogenin在转染后的MSCs中有表达;免疫荧光检测证实诱导后的MSCs可以表达MyoD蛋白. 结论:MSCs可以被Ad-GFP有效转染而表达GFP;同时内源性成肌调节因子的激活,可以促进MSCs的成肌分化.
目的:研究重組腺病毒(Ad)對骨髓基質榦細胞(MSCs)的轉染,以及綠色熒光蛋白(GFP)和成肌調節因子MyoD和Myogenin在MSCs中的錶達. 方法:用差速貼壁法體外培養大鼠MSCs,併用流式細胞儀(FCM)檢測其錶麵標誌;對構建有綠色熒光蛋白的重組腺病毒(Ad-GFP)進行擴增和鑒定,併轉染MSCs;用RT-PCR檢測MyoD和Myogenin在轉染後MSCs中的錶達;將MSCs與C2C12成肌細胞共培養,誘導前者的分化,併用免疫熒光檢測MyoD的錶達. 結果:FCM檢測證實,在MSCs的錶麵標誌中CD11b和CD45陰性,而CD29和CD44暘性;隨著Ad-GFP感染複數(MOI)的增加,轉染效率也相應提高,但在MOI大于100後,MSCs開始齣現病變;RT-PCR結果提示MyoD和Myogenin在轉染後的MSCs中有錶達;免疫熒光檢測證實誘導後的MSCs可以錶達MyoD蛋白. 結論:MSCs可以被Ad-GFP有效轉染而錶達GFP;同時內源性成肌調節因子的激活,可以促進MSCs的成肌分化.
목적:연구중조선병독(Ad)대골수기질간세포(MSCs)적전염,이급록색형광단백(GFP)화성기조절인자MyoD화Myogenin재MSCs중적표체. 방법:용차속첩벽법체외배양대서MSCs,병용류식세포의(FCM)검측기표면표지;대구건유록색형광단백적중조선병독(Ad-GFP)진행확증화감정,병전염MSCs;용RT-PCR검측MyoD화Myogenin재전염후MSCs중적표체;장MSCs여C2C12성기세포공배양,유도전자적분화,병용면역형광검측MyoD적표체. 결과:FCM검측증실,재MSCs적표면표지중CD11b화CD45음성,이CD29화CD44양성;수착Ad-GFP감염복수(MOI)적증가,전염효솔야상응제고,단재MOI대우100후,MSCs개시출현병변;RT-PCR결과제시MyoD화Myogenin재전염후적MSCs중유표체;면역형광검측증실유도후적MSCs가이표체MyoD단백. 결론:MSCs가이피Ad-GFP유효전염이표체GFP;동시내원성성기조절인자적격활,가이촉진MSCs적성기분화.
