复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2006年
5期
647-650,661
,共5页
L-型选择蛋白配体凝集素%杆状病毒%ZZ-结构域
L-型選擇蛋白配體凝集素%桿狀病毒%ZZ-結構域
L-형선택단백배체응집소%간상병독%ZZ-결구역
目的 利用昆虫细胞杆状病毒系统表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素(human recombinant soluble L-selectin:sL-selectin),探索在真核细胞中高效表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素的新途径.方法 将已经重组好的杆状病毒感染昆虫细胞,表达sL-选凝素于细胞培养上清,利用末端连接的 ZZ-结构域(蛋白A来源的首尾相连的二聚化Z结构域)与IgG-琼脂糖-6的结合而分离纯化,通过 SDS-PAGE鉴定分子量的大小,并用特异性抗体验证,另外通过重组的sL-选凝素与SMMC7721的黏附观察其活性.结果 sL-选凝素可在昆虫细胞中表达,产物的分子量约为46 000,与人肝癌细胞SMMC7721的结合率可达70%.结论 sL-选凝素可通过杆状病毒载体在昆虫细胞中有效表达,分离纯化后依然保持生理活性.
目的 利用昆蟲細胞桿狀病毒繫統錶達人的重組可溶性L-型選擇蛋白配體凝集素(human recombinant soluble L-selectin:sL-selectin),探索在真覈細胞中高效錶達人的重組可溶性L-型選擇蛋白配體凝集素的新途徑.方法 將已經重組好的桿狀病毒感染昆蟲細胞,錶達sL-選凝素于細胞培養上清,利用末耑連接的 ZZ-結構域(蛋白A來源的首尾相連的二聚化Z結構域)與IgG-瓊脂糖-6的結閤而分離純化,通過 SDS-PAGE鑒定分子量的大小,併用特異性抗體驗證,另外通過重組的sL-選凝素與SMMC7721的黏附觀察其活性.結果 sL-選凝素可在昆蟲細胞中錶達,產物的分子量約為46 000,與人肝癌細胞SMMC7721的結閤率可達70%.結論 sL-選凝素可通過桿狀病毒載體在昆蟲細胞中有效錶達,分離純化後依然保持生理活性.
목적 이용곤충세포간상병독계통표체인적중조가용성L-형선택단백배체응집소(human recombinant soluble L-selectin:sL-selectin),탐색재진핵세포중고효표체인적중조가용성L-형선택단백배체응집소적신도경.방법 장이경중조호적간상병독감염곤충세포,표체sL-선응소우세포배양상청,이용말단련접적 ZZ-결구역(단백A래원적수미상련적이취화Z결구역)여IgG-경지당-6적결합이분리순화,통과 SDS-PAGE감정분자량적대소,병용특이성항체험증,령외통과중조적sL-선응소여SMMC7721적점부관찰기활성.결과 sL-선응소가재곤충세포중표체,산물적분자량약위46 000,여인간암세포SMMC7721적결합솔가체70%.결론 sL-선응소가통과간상병독재체재곤충세포중유효표체,분리순화후의연보지생리활성.
