吉林大学学报（医学版）
吉林大學學報（醫學版）
길림대학학보（의학판）
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)
2006年
6期
977-980
,共4页
姜秋%聂代邦%欧阳红生%谢艳林%孙宏晨
薑鞦%聶代邦%歐暘紅生%謝豔林%孫宏晨
강추%섭대방%구양홍생%사염림%손굉신
釉质丝氨酸蛋白酶%小鼠%基因敲除%打靶载体
釉質絲氨痠蛋白酶%小鼠%基因敲除%打靶載體
유질사안산단백매%소서%기인고제%타파재체
目的:对牙釉质丝氨酸蛋白酶(EMSP1)基因进行体外扩增,构建基因打靶载体,利用基因打靶技术建立转基因动物模型,研究EMSP1生理功能和病理学意义.方法:根据EMSP1的DNA序列,采用Oligo 6.0软件设计两对引物,以129品系小鼠基因组DNA为模板,分别扩增长为5 000 bp和1 700 bp片段作为同源长短臂.将其分别插入通用型基因敲除载体pSSC-9的正向筛选基因neo两侧,用PCR方法、限制性酶切和DNA序列分析进行鉴定.结果:采用双酶切鉴定,阳性重组克隆分别切出5000 bp和1700 bp片段,表明长短臂已克隆于载体中.DNA序列分析表明,成功构建EMSP1基因打靶载体pSSC-9- EMSP1.结论:成功构建小鼠EMSP1基因打靶载体.
目的:對牙釉質絲氨痠蛋白酶(EMSP1)基因進行體外擴增,構建基因打靶載體,利用基因打靶技術建立轉基因動物模型,研究EMSP1生理功能和病理學意義.方法:根據EMSP1的DNA序列,採用Oligo 6.0軟件設計兩對引物,以129品繫小鼠基因組DNA為模闆,分彆擴增長為5 000 bp和1 700 bp片段作為同源長短臂.將其分彆插入通用型基因敲除載體pSSC-9的正嚮篩選基因neo兩側,用PCR方法、限製性酶切和DNA序列分析進行鑒定.結果:採用雙酶切鑒定,暘性重組剋隆分彆切齣5000 bp和1700 bp片段,錶明長短臂已剋隆于載體中.DNA序列分析錶明,成功構建EMSP1基因打靶載體pSSC-9- EMSP1.結論:成功構建小鼠EMSP1基因打靶載體.
목적:대아유질사안산단백매(EMSP1)기인진행체외확증,구건기인타파재체,이용기인타파기술건립전기인동물모형,연구EMSP1생리공능화병이학의의.방법:근거EMSP1적DNA서렬,채용Oligo 6.0연건설계량대인물,이129품계소서기인조DNA위모판,분별확증장위5 000 bp화1 700 bp편단작위동원장단비.장기분별삽입통용형기인고제재체pSSC-9적정향사선기인neo량측,용PCR방법、한제성매절화DNA서렬분석진행감정.결과:채용쌍매절감정,양성중조극륭분별절출5000 bp화1700 bp편단,표명장단비이극륭우재체중.DNA서렬분석표명,성공구건EMSP1기인타파재체pSSC-9- EMSP1.결론:성공구건소서EMSP1기인타파재체.
