中国癌症杂志
中國癌癥雜誌
중국암증잡지
CHINA ONCOLOGY
2006年
10期
805-808
,共4页
蒋明东%彭志平%尹晓玲%李少林%仝蜀生%鄢勇%王正洪
蔣明東%彭誌平%尹曉玲%李少林%仝蜀生%鄢勇%王正洪
장명동%팽지평%윤효령%리소림%동촉생%언용%왕정홍
RNAi%胃癌细胞株%hTERT%稳定抑制
RNAi%胃癌細胞株%hTERT%穩定抑製
RNAi%위암세포주%hTERT%은정억제
背景与目的:胃癌是全人类常见恶性肿瘤之一.在我国, 胃癌居各种癌症死亡之首,其总体五年生存率仅15%~20%.在目前尚无有效一级预防措施的情况下, 积极探讨有效防治胃癌的方法成为必然趋势.本研究利用RNA干扰稳定筛选-抑制技术,抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达,探讨靶向hTERT基因RNAi对胃癌细胞增殖的抑制效应.方法:设计靶向hTERT基因的小干扰RNA,构建重组表达质粒pGenesil-shRNA-hTERT并导入人胃癌细胞系SGC7901细胞株,经G418筛选,建立稳定表达siRNA-hTERT的细胞株.采用real time RT-PCR、MTT和PCR-TRAP法同时检测pGenesil-shRNA-hTERT稳定抑制组和未处理SGC7901细胞组hTERT基因表达、端粒酶活性及细胞增殖变化.结果:在稳定表达pGenesil-shRNA-hTERT的SGC7901细胞株中,RNAi效力持续、稳定存在, hTERT mRNA表达、端粒酶活性明显降低,瘤细胞增殖被抑制.结论:RNA干扰能持续、稳定地抑制靶基因hTERT mRNA表达及肿瘤细胞增殖,是潜在的肿瘤基因治疗新方法.
揹景與目的:胃癌是全人類常見噁性腫瘤之一.在我國, 胃癌居各種癌癥死亡之首,其總體五年生存率僅15%~20%.在目前尚無有效一級預防措施的情況下, 積極探討有效防治胃癌的方法成為必然趨勢.本研究利用RNA榦擾穩定篩選-抑製技術,抑製人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)基因錶達,探討靶嚮hTERT基因RNAi對胃癌細胞增殖的抑製效應.方法:設計靶嚮hTERT基因的小榦擾RNA,構建重組錶達質粒pGenesil-shRNA-hTERT併導入人胃癌細胞繫SGC7901細胞株,經G418篩選,建立穩定錶達siRNA-hTERT的細胞株.採用real time RT-PCR、MTT和PCR-TRAP法同時檢測pGenesil-shRNA-hTERT穩定抑製組和未處理SGC7901細胞組hTERT基因錶達、耑粒酶活性及細胞增殖變化.結果:在穩定錶達pGenesil-shRNA-hTERT的SGC7901細胞株中,RNAi效力持續、穩定存在, hTERT mRNA錶達、耑粒酶活性明顯降低,瘤細胞增殖被抑製.結論:RNA榦擾能持續、穩定地抑製靶基因hTERT mRNA錶達及腫瘤細胞增殖,是潛在的腫瘤基因治療新方法.
배경여목적:위암시전인류상견악성종류지일.재아국, 위암거각충암증사망지수,기총체오년생존솔부15%~20%.재목전상무유효일급예방조시적정황하, 적겁탐토유효방치위암적방법성위필연추세.본연구이용RNA간우은정사선-억제기술,억제인단립매역전록매(hTERT)기인표체,탐토파향hTERT기인RNAi대위암세포증식적억제효응.방법:설계파향hTERT기인적소간우RNA,구건중조표체질립pGenesil-shRNA-hTERT병도입인위암세포계SGC7901세포주,경G418사선,건립은정표체siRNA-hTERT적세포주.채용real time RT-PCR、MTT화PCR-TRAP법동시검측pGenesil-shRNA-hTERT은정억제조화미처리SGC7901세포조hTERT기인표체、단립매활성급세포증식변화.결과:재은정표체pGenesil-shRNA-hTERT적SGC7901세포주중,RNAi효력지속、은정존재, hTERT mRNA표체、단립매활성명현강저,류세포증식피억제.결론:RNA간우능지속、은정지억제파기인hTERT mRNA표체급종류세포증식,시잠재적종류기인치료신방법.