中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2009年
1期
73-76
,共4页
王滇%张春燕%刘松柏%杨利国
王滇%張春燕%劉鬆柏%楊利國
왕전%장춘연%류송백%양리국
牛%卵母细胞%胞质内直接注射%重构胚胎%化学激活
牛%卵母細胞%胞質內直接註射%重構胚胎%化學激活
우%란모세포%포질내직접주사%중구배태%화학격활
本研究主要研究了Ⅰ:Ionomyein+6-甲氨基嘌呤(6-DMAP)、Ⅱ:Ionomycin+放线菌酮(CHX)、Ⅲ:体积分数7%乙醇+6-DMAP、Ⅳ:体积分数7%乙醇+CHX 4种不同化学激活方法对牛胞质内卵丘细胞全细胞注射法所获得重构胚的激活及前期发育的影响.Ionomyein和7%乙醇的处理时间为5 min,6-DMAP的处理时间为4 h,CHX的处理时间为5 h.结果表明,重构胚与颗粒细胞单层细胞共培养2 d后,各组卵裂率分别为52.6%、52.8%、53.8%和54.2%,差异不显著(P>0.05);培养8 d后,Ⅰ组激活的囊胚发育率(20.0%)极显著高于其他组(P<0.01),其他各组之间差异不显著,分别为8.5%、10.2%和6.1%;培养10 d后,Ⅰ组激活的囊胚孵化率(10.7%)极显著高于其他组(P<0.01),其他各组之间差异不显著,分别为2.3%、3.0%和1.8%.结果提示,4种激活方法均可以有效的激活重构胚,但Ionomycin+6-DMAP法激活重构胚的囊胚率和囊胚孵化率均极显著高于其它3组,说明Ionomycin+6-DMAP激活法有利于牛重构胚的发育,可以获得较理想的囊胚率,是胞质内全细胞注射法克隆的理想激活方法.
本研究主要研究瞭Ⅰ:Ionomyein+6-甲氨基嘌呤(6-DMAP)、Ⅱ:Ionomycin+放線菌酮(CHX)、Ⅲ:體積分數7%乙醇+6-DMAP、Ⅳ:體積分數7%乙醇+CHX 4種不同化學激活方法對牛胞質內卵丘細胞全細胞註射法所穫得重構胚的激活及前期髮育的影響.Ionomyein和7%乙醇的處理時間為5 min,6-DMAP的處理時間為4 h,CHX的處理時間為5 h.結果錶明,重構胚與顆粒細胞單層細胞共培養2 d後,各組卵裂率分彆為52.6%、52.8%、53.8%和54.2%,差異不顯著(P>0.05);培養8 d後,Ⅰ組激活的囊胚髮育率(20.0%)極顯著高于其他組(P<0.01),其他各組之間差異不顯著,分彆為8.5%、10.2%和6.1%;培養10 d後,Ⅰ組激活的囊胚孵化率(10.7%)極顯著高于其他組(P<0.01),其他各組之間差異不顯著,分彆為2.3%、3.0%和1.8%.結果提示,4種激活方法均可以有效的激活重構胚,但Ionomycin+6-DMAP法激活重構胚的囊胚率和囊胚孵化率均極顯著高于其它3組,說明Ionomycin+6-DMAP激活法有利于牛重構胚的髮育,可以穫得較理想的囊胚率,是胞質內全細胞註射法剋隆的理想激活方法.
본연구주요연구료Ⅰ:Ionomyein+6-갑안기표령(6-DMAP)、Ⅱ:Ionomycin+방선균동(CHX)、Ⅲ:체적분수7%을순+6-DMAP、Ⅳ:체적분수7%을순+CHX 4충불동화학격활방법대우포질내란구세포전세포주사법소획득중구배적격활급전기발육적영향.Ionomyein화7%을순적처리시간위5 min,6-DMAP적처리시간위4 h,CHX적처리시간위5 h.결과표명,중구배여과립세포단층세포공배양2 d후,각조란렬솔분별위52.6%、52.8%、53.8%화54.2%,차이불현저(P>0.05);배양8 d후,Ⅰ조격활적낭배발육솔(20.0%)겁현저고우기타조(P<0.01),기타각조지간차이불현저,분별위8.5%、10.2%화6.1%;배양10 d후,Ⅰ조격활적낭배부화솔(10.7%)겁현저고우기타조(P<0.01),기타각조지간차이불현저,분별위2.3%、3.0%화1.8%.결과제시,4충격활방법균가이유효적격활중구배,단Ionomycin+6-DMAP법격활중구배적낭배솔화낭배부화솔균겁현저고우기타3조,설명Ionomycin+6-DMAP격활법유리우우중구배적발육,가이획득교이상적낭배솔,시포질내전세포주사법극륭적이상격활방법.