CAJ | 학술논문

[目的]探讨丹参单体丹酚酸B(SalB)在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的情况及Desmin和α-actin mRNA的表达,确定大鼠MSCs体外诱导为心肌样细胞的条件、规律及转化细胞的特点.[方法]选用成年近交系Wistar大鼠,利用percoll分离液进行密度梯度离心法和直接贴壁法进行分离、提纯MSCs,并进行培养扩增.免疫组化方法对第9代MSCs表面抗原进行鉴定.分别应用10μmol/L5-氮胞苷(5-azaeytidine,5-aza)及250μg/L SalB联合5-aza(5-aza+SalB)对第9代的MSCs进行联合诱导24 h,于诱导后第4周,用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PcR)法检测Desmin、α-actin mRNA的表达.[结果] 1)第9代MSCs免疫组化染色CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达.2)诱导4周后,细胞体积变小,可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构.5-aza组、5-aza+SalB组均出现明确的心肌早期分化基因与5-aza组相比,5-aza+SalB组的Desmin和α-actin mRNA表达明显增强.[结论] SalB具有促进5-aza诱导的MSCs向心肌样细胞分化的作用.
[목적]탐토단삼단체단분산B(SalB)재체외유도대서골수간충질간세포(MSCs)분화위심기양세포적정황급Desmin화α-actin mRNA적표체,학정대서MSCs체외유도위심기양세포적조건、규률급전화세포적특점.[방법]선용성년근교계Wistar대서,이용percoll분리액진행밀도제도리심법화직접첩벽법진행분리、제순MSCs,병진행배양확증.면역조화방법대제9대MSCs표면항원진행감정.분별응용10μmol/L5-담포감(5-azaeytidine,5-aza)급250μg/L SalB연합5-aza(5-aza+SalB)대제9대적MSCs진행연합유도24 h,우유도후제4주,용실시형광정량역전록-취합매련반응(RT-PcR)법검측Desmin、α-actin mRNA적표체.[결과] 1)제9대MSCs면역조화염색CD44정양성표체,CD34정음성표체.2)유도4주후,세포체적변소,가견유궤개세포련접형성적다핵기관양결구.5-aza조、5-aza+SalB조균출현명학적심기조기분화기인여5-aza조상비,5-aza+SalB조적Desmin화α-actin mRNA표체명현증강.[결론] SalB구유촉진5-aza유도적MSCs향심기양세포분화적작용.