解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2010年
2期
131-134
,共4页
PC12细胞%慢病毒%RNA干扰%髓样分化因子初次应答基因88
PC12細胞%慢病毒%RNA榦擾%髓樣分化因子初次應答基因88
PC12세포%만병독%RNA간우%수양분화인자초차응답기인88
目的 研究慢病毒介导的RNA干扰对PC12细胞的转染效率和对MyD88基因的抑制效率.方法 构建针对大鼠MyD88基因3个靶点的ShRNA慢病毒载体,PC12细胞按照不同的转染条件分为正常组(DMEM完全培养液)、DMEM加入polybrene组、EN.iS(Enhance infection solution)组、EN.iS加入polybrene组.荧光显微镜下观察不同组的转染效率,采用Real-time PCR和Western blot检测不同的靶点对MyD88的不同沉默效率.结果 病毒滴度为1×108 TU/ml,MOI为100时,PC12细胞在EN.iS组的转染效率最高,转染试剂polybrene对转染效率无明显影响,沉默效率最高的靶点是5'-CATAC GCAACCAGCAGAAA-3''.结论 慢病毒介导的RNA干扰是一种高效的基因沉默手段,可以对PC12细胞中MyD88的功能进行长期的研究.
目的 研究慢病毒介導的RNA榦擾對PC12細胞的轉染效率和對MyD88基因的抑製效率.方法 構建針對大鼠MyD88基因3箇靶點的ShRNA慢病毒載體,PC12細胞按照不同的轉染條件分為正常組(DMEM完全培養液)、DMEM加入polybrene組、EN.iS(Enhance infection solution)組、EN.iS加入polybrene組.熒光顯微鏡下觀察不同組的轉染效率,採用Real-time PCR和Western blot檢測不同的靶點對MyD88的不同沉默效率.結果 病毒滴度為1×108 TU/ml,MOI為100時,PC12細胞在EN.iS組的轉染效率最高,轉染試劑polybrene對轉染效率無明顯影響,沉默效率最高的靶點是5'-CATAC GCAACCAGCAGAAA-3''.結論 慢病毒介導的RNA榦擾是一種高效的基因沉默手段,可以對PC12細胞中MyD88的功能進行長期的研究.
목적 연구만병독개도적RNA간우대PC12세포적전염효솔화대MyD88기인적억제효솔.방법 구건침대대서MyD88기인3개파점적ShRNA만병독재체,PC12세포안조불동적전염조건분위정상조(DMEM완전배양액)、DMEM가입polybrene조、EN.iS(Enhance infection solution)조、EN.iS가입polybrene조.형광현미경하관찰불동조적전염효솔,채용Real-time PCR화Western blot검측불동적파점대MyD88적불동침묵효솔.결과 병독적도위1×108 TU/ml,MOI위100시,PC12세포재EN.iS조적전염효솔최고,전염시제polybrene대전염효솔무명현영향,침묵효솔최고적파점시5'-CATAC GCAACCAGCAGAAA-3''.결론 만병독개도적RNA간우시일충고효적기인침묵수단,가이대PC12세포중MyD88적공능진행장기적연구.
