汕头大学医学院学报
汕頭大學醫學院學報
산두대학의학원학보
JOURNAL OF SHANTOU UNIVERSITY MEDICAL COLLEGE
2010年
2期
84-88
,共5页
王革非%彭程%张驰%曾祥兴%李康生
王革非%彭程%張馳%曾祥興%李康生
왕혁비%팽정%장치%증상흥%리강생
载脂蛋白B%mRNA编辑酶催化多肽样蛋白质3F/3G%锌结合域%蛋白转导
載脂蛋白B%mRNA編輯酶催化多肽樣蛋白質3F/3G%鋅結閤域%蛋白轉導
재지단백B%mRNA편집매최화다태양단백질3F/3G%자결합역%단백전도
目的:分析载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白质3F和3G(APOBEC3F/3G)的蛋白基序,获得具有细胞转导潜力的抗病毒基序融合蛋白.方法:用MotifScan软件对APOBEC3F/3G进行生物信息学分析,找出APOBEC3F/3G中的锌结合域(ZBRs).通过PCR及多步酶切克隆得到APOBEC3F/3G的3个串联ZBRs基因片段,并将其与人免疫缺陷病毒(HIV)的TAT蛋白转导域基因克隆至原核表达载体(pET32a),转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达.结果:酶切和测序鉴定,得到含有HIV-TAT和3个ZBRs基因的重组质粒;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分析,融合蛋白在BL21(DE3)中获得表达,占菌体总蛋白的20%.结论:获得含HIV-TAT和3个ZBRs的融合表达重组蛋白,为进一步研究APOBEC3F/3G抗病毒机制,也为其在抗病毒治疗中的应用打下基础.
目的:分析載脂蛋白B mRNA編輯酶催化多肽樣蛋白質3F和3G(APOBEC3F/3G)的蛋白基序,穫得具有細胞轉導潛力的抗病毒基序融閤蛋白.方法:用MotifScan軟件對APOBEC3F/3G進行生物信息學分析,找齣APOBEC3F/3G中的鋅結閤域(ZBRs).通過PCR及多步酶切剋隆得到APOBEC3F/3G的3箇串聯ZBRs基因片段,併將其與人免疫缺陷病毒(HIV)的TAT蛋白轉導域基因剋隆至原覈錶達載體(pET32a),轉化大腸桿菌BL21(DE3)併誘導錶達.結果:酶切和測序鑒定,得到含有HIV-TAT和3箇ZBRs基因的重組質粒;十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測分析,融閤蛋白在BL21(DE3)中穫得錶達,佔菌體總蛋白的20%.結論:穫得含HIV-TAT和3箇ZBRs的融閤錶達重組蛋白,為進一步研究APOBEC3F/3G抗病毒機製,也為其在抗病毒治療中的應用打下基礎.
목적:분석재지단백B mRNA편집매최화다태양단백질3F화3G(APOBEC3F/3G)적단백기서,획득구유세포전도잠력적항병독기서융합단백.방법:용MotifScan연건대APOBEC3F/3G진행생물신식학분석,조출APOBEC3F/3G중적자결합역(ZBRs).통과PCR급다보매절극륭득도APOBEC3F/3G적3개천련ZBRs기인편단,병장기여인면역결함병독(HIV)적TAT단백전도역기인극륭지원핵표체재체(pET32a),전화대장간균BL21(DE3)병유도표체.결과:매절화측서감정,득도함유HIV-TAT화3개ZBRs기인적중조질립;십이완기류산납-취병희선알응효전영검측분석,융합단백재BL21(DE3)중획득표체,점균체총단백적20%.결론:획득함HIV-TAT화3개ZBRs적융합표체중조단백,위진일보연구APOBEC3F/3G항병독궤제,야위기재항병독치료중적응용타하기출.
