畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2010年
12期
1622-1628
,共7页
古少鹏%侯金环%陈赵英%李宝钧%郑明学
古少鵬%侯金環%陳趙英%李寶鈞%鄭明學
고소붕%후금배%진조영%리보균%정명학
E.tenella%鸡胚盲肠上皮细胞%体外培养%营养条件%发育过程
E.tenella%鷄胚盲腸上皮細胞%體外培養%營養條件%髮育過程
E.tenella%계배맹장상피세포%체외배양%영양조건%발육과정
探讨E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养的营养条件,观察其发育过程.用鸡胚盲肠上皮细胞体外培养E.tenella,对子孢子接种基础培养基、营养物质含量及血清浓度进行了优选,并对优化营养条件下E.tenella的发育过程进行了观察.MEM199培养基中24、48、72 h的虫体感染率显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于DMEM培养基;MEM199培养基中叶酸、VB6、VB1的含量为6 mg·L-1时,24、48、72 h的虫体感染率显著(P<0.05)高于其他组,分别为25.33%、12.67%和12.33%;MEM199培养基中葡萄糖含量为3 000 mg·L-1,胰岛素含量为0.40 mg·L-1时,有较多的成熟裂殖体形成;接种子孢子后于4、48、96 h换液,接种时和4、48 h血清浓度为2.5%,96 h为1%,有利于子孢子的后期发育;优化营养条件下,细胞接种子孢子后4、24、48、72、96、120 h的细胞虫体感染率分别为42%、28%、20%、15%、13.67%、13.67%,且E.tenella可在鸡胚盲肠上皮细胞中完成内生发育过程,并形成卵囊.结果表明,获得了能使E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞完成整个内生发育的体外培养营养条件.
探討E.tenella在鷄胚盲腸上皮細胞體外培養的營養條件,觀察其髮育過程.用鷄胚盲腸上皮細胞體外培養E.tenella,對子孢子接種基礎培養基、營養物質含量及血清濃度進行瞭優選,併對優化營養條件下E.tenella的髮育過程進行瞭觀察.MEM199培養基中24、48、72 h的蟲體感染率顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)高于DMEM培養基;MEM199培養基中葉痠、VB6、VB1的含量為6 mg·L-1時,24、48、72 h的蟲體感染率顯著(P<0.05)高于其他組,分彆為25.33%、12.67%和12.33%;MEM199培養基中葡萄糖含量為3 000 mg·L-1,胰島素含量為0.40 mg·L-1時,有較多的成熟裂殖體形成;接種子孢子後于4、48、96 h換液,接種時和4、48 h血清濃度為2.5%,96 h為1%,有利于子孢子的後期髮育;優化營養條件下,細胞接種子孢子後4、24、48、72、96、120 h的細胞蟲體感染率分彆為42%、28%、20%、15%、13.67%、13.67%,且E.tenella可在鷄胚盲腸上皮細胞中完成內生髮育過程,併形成卵囊.結果錶明,穫得瞭能使E.tenella在鷄胚盲腸上皮細胞完成整箇內生髮育的體外培養營養條件.
탐토E.tenella재계배맹장상피세포체외배양적영양조건,관찰기발육과정.용계배맹장상피세포체외배양E.tenella,대자포자접충기출배양기、영양물질함량급혈청농도진행료우선,병대우화영양조건하E.tenella적발육과정진행료관찰.MEM199배양기중24、48、72 h적충체감염솔현저(P<0.05)혹겁현저(P<0.01)고우DMEM배양기;MEM199배양기중협산、VB6、VB1적함량위6 mg·L-1시,24、48、72 h적충체감염솔현저(P<0.05)고우기타조,분별위25.33%、12.67%화12.33%;MEM199배양기중포도당함량위3 000 mg·L-1,이도소함량위0.40 mg·L-1시,유교다적성숙렬식체형성;접충자포자후우4、48、96 h환액,접충시화4、48 h혈청농도위2.5%,96 h위1%,유리우자포자적후기발육;우화영양조건하,세포접충자포자후4、24、48、72、96、120 h적세포충체감염솔분별위42%、28%、20%、15%、13.67%、13.67%,차E.tenella가재계배맹장상피세포중완성내생발육과정,병형성란낭.결과표명,획득료능사E.tenella재계배맹장상피세포완성정개내생발육적체외배양영양조건.
