中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2011年
8期
708-711
,共4页
王川%吴润%李发弟%刁小龙%赵春林%王芳
王川%吳潤%李髮弟%刁小龍%趙春林%王芳
왕천%오윤%리발제%조소룡%조춘림%왕방
PrP%RT-PCR%实时荧光定量PCR%标准曲线%质粒%绵羊
PrP%RT-PCR%實時熒光定量PCR%標準麯線%質粒%綿羊
PrP%RT-PCR%실시형광정량PCR%표준곡선%질립%면양
目的:为能够用实时荧光定量PCR研究消化系统PrP mRNA的表达水平,构建目的基因PrP的标准品质粒和标准曲线.方法:根据GenBank中绵羊基因编码区保守序列,设计特异性引物和分子信标探针;提取总RNA,经反转录、RT-PCR后,提取质粒,PCR-SSCP及测序鉴定,获得ARQ质粒；将质粒梯度稀释,进行荧光定量PCR,获得标准曲线及回归方程.结果:结果显示,本实验设计的分子信标具有特异性强、灵敏度高和结果准确的特性；标准曲线相关系数r2=0.999,表明线性关系好,成功构建了目的基因的标准品质粒和标准曲线.
目的:為能夠用實時熒光定量PCR研究消化繫統PrP mRNA的錶達水平,構建目的基因PrP的標準品質粒和標準麯線.方法:根據GenBank中綿羊基因編碼區保守序列,設計特異性引物和分子信標探針;提取總RNA,經反轉錄、RT-PCR後,提取質粒,PCR-SSCP及測序鑒定,穫得ARQ質粒；將質粒梯度稀釋,進行熒光定量PCR,穫得標準麯線及迴歸方程.結果:結果顯示,本實驗設計的分子信標具有特異性彊、靈敏度高和結果準確的特性；標準麯線相關繫數r2=0.999,錶明線性關繫好,成功構建瞭目的基因的標準品質粒和標準麯線.
목적:위능구용실시형광정량PCR연구소화계통PrP mRNA적표체수평,구건목적기인PrP적표준품질립화표준곡선.방법:근거GenBank중면양기인편마구보수서렬,설계특이성인물화분자신표탐침;제취총RNA,경반전록、RT-PCR후,제취질립,PCR-SSCP급측서감정,획득ARQ질립；장질립제도희석,진행형광정량PCR,획득표준곡선급회귀방정.결과:결과현시,본실험설계적분자신표구유특이성강、령민도고화결과준학적특성；표준곡선상관계수r2=0.999,표명선성관계호,성공구건료목적기인적표준품질립화표준곡선.
