听力学及言语疾病杂志
聽力學及言語疾病雜誌
은역학급언어질병잡지
JOURNAL OF AUDIOLOGY AND SPEECH PATHOLOGY
2012年
4期
349-353
,共5页
任毅%周琦%唐安洲%谭颂华%方勤%谢利红%尹时华
任毅%週琦%唐安洲%譚頌華%方勤%謝利紅%尹時華
임의%주기%당안주%담송화%방근%사리홍%윤시화
脑红蛋白%基因转染%阳离子脂质体%耳蜗%庆大霉素
腦紅蛋白%基因轉染%暘離子脂質體%耳蝸%慶大黴素
뇌홍단백%기인전염%양리자지질체%이와%경대매소
目的 验证阳离子脂质体介导脑红蛋白(neuroglobin,NGB)基因转染对庆大霉素致豚鼠耳毒性的保护作用.方法 将ABR反应阈均不超过40 dB SPL的120只健康花色豚鼠随机分为5组,每组24只:Ⅰ组:空白对照组;Ⅱ组:人工外淋巴液对照组(经左耳注入人工外淋巴液);Ⅲ组:人工外淋巴液实验组(经左耳注入人工外淋巴液后肌肉注射庆大霉素);Ⅳ组:空质粒转染组(经左耳注入空质粒pEGFP-C1后肌肉注射庆大霉素);Ⅴ组:NGB基因转染组(经左耳注入pEGFP-NGB后肌肉注射庆大霉素),庆大霉素均经后腿肌肉注射120 mg·kg-1·d-1,共给药14天.停止给药后喂养14天,各组均行ABR检测,耳蜗基底膜铺片、免疫组化观察各组豚鼠耳蜗基底膜毛细胞形态学及NGB蛋白表达的变化.结果 给药后Ⅰ组ABR反应阈平均为37.22 dB SPL(左耳)和36.94 dB SPL(右耳),Ⅱ组阈值平均为37.22 dB SPL(左耳)和37.50 dB SPL(右耳),Ⅲ组阈值平均为119.44 dB SPL(左耳)和122.22 dB SPL(右耳); Ⅳ组阈值平均为119.72 dB SPL(左耳)和120.83 dB SPL(右耳) ;Ⅴ组阈值平均为83.89 dB SPL(左耳)和100.56 dB SPL(右耳).Ⅴ组ABR反应阈较Ⅰ组和Ⅱ组显著升高(P<0.05),较Ⅲ组和Ⅳ组显著降低(P<0.05).Ⅴ组中手术耳ABR反应阈较非手术耳降低(P<0.05).耳蜗基底膜铺片示Ⅰ组和Ⅱ组内外毛细胞排列整齐,无缺失,Ⅲ组和Ⅳ组内外毛细胞极少量残存,其中ABR阈值大于135 dB SPL的豚鼠耳蜗毛细胞几乎消失殆尽,Ⅴ组毛细胞部分缺失,且主要是外毛细胞;免疫组织化学染色示Ⅴ组耳蜗毛细胞NGB蛋白表达量较其余各组均显著增高(P<0.05),其余各组几乎均未见明显阳性表达.结论 本研究成功验证了阳离子脂质体介导NGB基因转染对庆大霉素致豚鼠耳毒性具有有效的保护作用.
目的 驗證暘離子脂質體介導腦紅蛋白(neuroglobin,NGB)基因轉染對慶大黴素緻豚鼠耳毒性的保護作用.方法 將ABR反應閾均不超過40 dB SPL的120隻健康花色豚鼠隨機分為5組,每組24隻:Ⅰ組:空白對照組;Ⅱ組:人工外淋巴液對照組(經左耳註入人工外淋巴液);Ⅲ組:人工外淋巴液實驗組(經左耳註入人工外淋巴液後肌肉註射慶大黴素);Ⅳ組:空質粒轉染組(經左耳註入空質粒pEGFP-C1後肌肉註射慶大黴素);Ⅴ組:NGB基因轉染組(經左耳註入pEGFP-NGB後肌肉註射慶大黴素),慶大黴素均經後腿肌肉註射120 mg·kg-1·d-1,共給藥14天.停止給藥後餵養14天,各組均行ABR檢測,耳蝸基底膜鋪片、免疫組化觀察各組豚鼠耳蝸基底膜毛細胞形態學及NGB蛋白錶達的變化.結果 給藥後Ⅰ組ABR反應閾平均為37.22 dB SPL(左耳)和36.94 dB SPL(右耳),Ⅱ組閾值平均為37.22 dB SPL(左耳)和37.50 dB SPL(右耳),Ⅲ組閾值平均為119.44 dB SPL(左耳)和122.22 dB SPL(右耳); Ⅳ組閾值平均為119.72 dB SPL(左耳)和120.83 dB SPL(右耳) ;Ⅴ組閾值平均為83.89 dB SPL(左耳)和100.56 dB SPL(右耳).Ⅴ組ABR反應閾較Ⅰ組和Ⅱ組顯著升高(P<0.05),較Ⅲ組和Ⅳ組顯著降低(P<0.05).Ⅴ組中手術耳ABR反應閾較非手術耳降低(P<0.05).耳蝸基底膜鋪片示Ⅰ組和Ⅱ組內外毛細胞排列整齊,無缺失,Ⅲ組和Ⅳ組內外毛細胞極少量殘存,其中ABR閾值大于135 dB SPL的豚鼠耳蝸毛細胞幾乎消失殆儘,Ⅴ組毛細胞部分缺失,且主要是外毛細胞;免疫組織化學染色示Ⅴ組耳蝸毛細胞NGB蛋白錶達量較其餘各組均顯著增高(P<0.05),其餘各組幾乎均未見明顯暘性錶達.結論 本研究成功驗證瞭暘離子脂質體介導NGB基因轉染對慶大黴素緻豚鼠耳毒性具有有效的保護作用.
목적 험증양리자지질체개도뇌홍단백(neuroglobin,NGB)기인전염대경대매소치돈서이독성적보호작용.방법 장ABR반응역균불초과40 dB SPL적120지건강화색돈서수궤분위5조,매조24지:Ⅰ조:공백대조조;Ⅱ조:인공외림파액대조조(경좌이주입인공외림파액);Ⅲ조:인공외림파액실험조(경좌이주입인공외림파액후기육주사경대매소);Ⅳ조:공질립전염조(경좌이주입공질립pEGFP-C1후기육주사경대매소);Ⅴ조:NGB기인전염조(경좌이주입pEGFP-NGB후기육주사경대매소),경대매소균경후퇴기육주사120 mg·kg-1·d-1,공급약14천.정지급약후위양14천,각조균행ABR검측,이와기저막포편、면역조화관찰각조돈서이와기저막모세포형태학급NGB단백표체적변화.결과 급약후Ⅰ조ABR반응역평균위37.22 dB SPL(좌이)화36.94 dB SPL(우이),Ⅱ조역치평균위37.22 dB SPL(좌이)화37.50 dB SPL(우이),Ⅲ조역치평균위119.44 dB SPL(좌이)화122.22 dB SPL(우이); Ⅳ조역치평균위119.72 dB SPL(좌이)화120.83 dB SPL(우이) ;Ⅴ조역치평균위83.89 dB SPL(좌이)화100.56 dB SPL(우이).Ⅴ조ABR반응역교Ⅰ조화Ⅱ조현저승고(P<0.05),교Ⅲ조화Ⅳ조현저강저(P<0.05).Ⅴ조중수술이ABR반응역교비수술이강저(P<0.05).이와기저막포편시Ⅰ조화Ⅱ조내외모세포배렬정제,무결실,Ⅲ조화Ⅳ조내외모세포겁소량잔존,기중ABR역치대우135 dB SPL적돈서이와모세포궤호소실태진,Ⅴ조모세포부분결실,차주요시외모세포;면역조직화학염색시Ⅴ조이와모세포NGB단백표체량교기여각조균현저증고(P<0.05),기여각조궤호균미견명현양성표체.결론 본연구성공험증료양리자지질체개도NGB기인전염대경대매소치돈서이독성구유유효적보호작용.