肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2012年
7期
495-500
,共6页
乳腺肿瘤%自噬%DNA损伤%5-氮杂-2'-脱氧胞苷
乳腺腫瘤%自噬%DNA損傷%5-氮雜-2'-脫氧胞苷
유선종류%자서%DNA손상%5-담잡-2'-탈양포감
目的:探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷对乳腺癌细胞自噬的影响及其可能的机制.方法:用依托泊苷、顺铂和5-氮杂-2’-脱氧胞苷处理乳腺癌细胞后,采用彗星实验测定细胞DNA损伤,蛋白质印迹法检测p53和p21蛋白表达；细胞自噬测定用3种方法:(1)蛋白质印迹法检测微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ (microtubule-associated protein1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)蛋白的表达；(2)用单丹磺酰戊二胺对乳腺癌细胞染色后,在荧光显微镜下计数自噬泡阳性细胞,并计算自噬泡阳性细胞百分比；(3)将pEGFP-LC3质粒转染至乳腺癌细胞后,在荧光显微镜下计数含绿色荧光蛋白的阳性细胞,并计算绿色荧光蛋白阳性细胞的百分比.结果:依托泊苷和顺铂均可诱导乳腺癌细胞DNA损伤和自噬,与对照组比较,药物处理组细胞的彗星长度增长(P＜0.01),p53、p21和LC3-Ⅱ蛋白表达上调.5-氮杂-2’-脱氧胞苷也可诱导乳腺癌细胞DNA损伤和自噬,与对照组比较,处理组细胞的彗星长度增长(P＜0.01),p53、p21和LC3- Ⅱ蛋白表达上调,自噬泡阳性细胞百分比和绿色荧光蛋白阳性细胞百分比上升,差异均有统计学意义(P＜0.05和P＜0.01).结论:5-氮杂-2’-脱氧胞苷可诱导乳腺癌细胞自噬,其机制可能与其所诱导的DNA损伤有关.
目的:探討5-氮雜-2’-脫氧胞苷對乳腺癌細胞自噬的影響及其可能的機製.方法:用依託泊苷、順鉑和5-氮雜-2’-脫氧胞苷處理乳腺癌細胞後,採用彗星實驗測定細胞DNA損傷,蛋白質印跡法檢測p53和p21蛋白錶達；細胞自噬測定用3種方法:(1)蛋白質印跡法檢測微管相關蛋白1輕鏈3-Ⅱ (microtubule-associated protein1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)蛋白的錶達；(2)用單丹磺酰戊二胺對乳腺癌細胞染色後,在熒光顯微鏡下計數自噬泡暘性細胞,併計算自噬泡暘性細胞百分比；(3)將pEGFP-LC3質粒轉染至乳腺癌細胞後,在熒光顯微鏡下計數含綠色熒光蛋白的暘性細胞,併計算綠色熒光蛋白暘性細胞的百分比.結果:依託泊苷和順鉑均可誘導乳腺癌細胞DNA損傷和自噬,與對照組比較,藥物處理組細胞的彗星長度增長(P＜0.01),p53、p21和LC3-Ⅱ蛋白錶達上調.5-氮雜-2’-脫氧胞苷也可誘導乳腺癌細胞DNA損傷和自噬,與對照組比較,處理組細胞的彗星長度增長(P＜0.01),p53、p21和LC3- Ⅱ蛋白錶達上調,自噬泡暘性細胞百分比和綠色熒光蛋白暘性細胞百分比上升,差異均有統計學意義(P＜0.05和P＜0.01).結論:5-氮雜-2’-脫氧胞苷可誘導乳腺癌細胞自噬,其機製可能與其所誘導的DNA損傷有關.
목적:탐토5-담잡-2’-탈양포감대유선암세포자서적영향급기가능적궤제.방법:용의탁박감、순박화5-담잡-2’-탈양포감처리유선암세포후,채용혜성실험측정세포DNA손상,단백질인적법검측p53화p21단백표체；세포자서측정용3충방법:(1)단백질인적법검측미관상관단백1경련3-Ⅱ (microtubule-associated protein1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)단백적표체；(2)용단단광선무이알대유선암세포염색후,재형광현미경하계수자서포양성세포,병계산자서포양성세포백분비；(3)장pEGFP-LC3질립전염지유선암세포후,재형광현미경하계수함록색형광단백적양성세포,병계산록색형광단백양성세포적백분비.결과:의탁박감화순박균가유도유선암세포DNA손상화자서,여대조조비교,약물처리조세포적혜성장도증장(P＜0.01),p53、p21화LC3-Ⅱ단백표체상조.5-담잡-2’-탈양포감야가유도유선암세포DNA손상화자서,여대조조비교,처리조세포적혜성장도증장(P＜0.01),p53、p21화LC3- Ⅱ단백표체상조,자서포양성세포백분비화록색형광단백양성세포백분비상승,차이균유통계학의의(P＜0.05화P＜0.01).결론:5-담잡-2’-탈양포감가유도유선암세포자서,기궤제가능여기소유도적DNA손상유관.
