热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2002年
4期
337-340
,共4页
林勇平%吴淑华%杨英%汤郡%马桂璋
林勇平%吳淑華%楊英%湯郡%馬桂璋
림용평%오숙화%양영%탕군%마계장
LMP1%cDNA%克隆%测序%原核表达
LMP1%cDNA%剋隆%測序%原覈錶達
LMP1%cDNA%극륭%측서%원핵표체
目的克隆EBV-LMP1 cDNA,构建EBV-LMP1基因的原核表达重组质粒.方法通过RT-PCR技术从B95-8细胞中扩增EBV-LMP1 cDNA,克隆至pGEM-T easy载体上并测序;利用引物上的BamHⅠ与HindⅢ酶切位点将LMP1基因插入载体pET-32a,转化JM109菌.提取质粒,限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳鉴定.结果扩增的LMP1 cDNA长度为1158bp,测序结果与已知序列吻合,重组原核表达质粒经酶切鉴定表明获得正确重组子.结论成功克隆了EBV-LMP1 cDNA,并构建了pET-32a-LMP1原核表达载体,为研究LMP1在EBV致瘤中的作用及肿瘤疫苗奠定了基础.
目的剋隆EBV-LMP1 cDNA,構建EBV-LMP1基因的原覈錶達重組質粒.方法通過RT-PCR技術從B95-8細胞中擴增EBV-LMP1 cDNA,剋隆至pGEM-T easy載體上併測序;利用引物上的BamHⅠ與HindⅢ酶切位點將LMP1基因插入載體pET-32a,轉化JM109菌.提取質粒,限製性內切酶消化,瓊脂糖凝膠電泳鑒定.結果擴增的LMP1 cDNA長度為1158bp,測序結果與已知序列吻閤,重組原覈錶達質粒經酶切鑒定錶明穫得正確重組子.結論成功剋隆瞭EBV-LMP1 cDNA,併構建瞭pET-32a-LMP1原覈錶達載體,為研究LMP1在EBV緻瘤中的作用及腫瘤疫苗奠定瞭基礎.
목적극륭EBV-LMP1 cDNA,구건EBV-LMP1기인적원핵표체중조질립.방법통과RT-PCR기술종B95-8세포중확증EBV-LMP1 cDNA,극륭지pGEM-T easy재체상병측서;이용인물상적BamHⅠ여HindⅢ매절위점장LMP1기인삽입재체pET-32a,전화JM109균.제취질립,한제성내절매소화,경지당응효전영감정.결과확증적LMP1 cDNA장도위1158bp,측서결과여이지서렬문합,중조원핵표체질립경매절감정표명획득정학중조자.결론성공극륭료EBV-LMP1 cDNA,병구건료pET-32a-LMP1원핵표체재체,위연구LMP1재EBV치류중적작용급종류역묘전정료기출.
