蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2001年
2期
100-103
,共4页
于威%金勇丰%吴玉澄%张耀洲
于威%金勇豐%吳玉澄%張耀洲
우위%금용봉%오옥징%장요주
人血小板因子Ⅳ%家蚕杆状病毒表达载体系统%表达
人血小闆因子Ⅳ%傢蠶桿狀病毒錶達載體繫統%錶達
인혈소판인자Ⅳ%가잠간상병독표체재체계통%표체
将人血小板因子Ⅳ(Human Platelet Factor Ⅳ,简称hPF4)基因重组于家蚕杆状病毒转移载体pBacPAK8中,获得重组转移载体pBacPAK-PF4,并与线性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕培养细胞,在细胞内发生同源重组,获得重组病毒BacPAK-PF4。Southern杂交结果表明重组病毒基因组中含有hPF4基因。重组病毒以MOI=10感染家蚕培养细胞(2×106个细胞)和家蚕5龄幼虫,表达产物用体外培养的血管内皮细胞测定其生物活性,测得表达量在家蚕培养细胞中第3天达到最高值为6.088μg/2×106个细胞;在蚕体内表达第5天达到最高值,表达量明显高于家蚕培养细胞。
將人血小闆因子Ⅳ(Human Platelet Factor Ⅳ,簡稱hPF4)基因重組于傢蠶桿狀病毒轉移載體pBacPAK8中,穫得重組轉移載體pBacPAK-PF4,併與線性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共轉染傢蠶培養細胞,在細胞內髮生同源重組,穫得重組病毒BacPAK-PF4。Southern雜交結果錶明重組病毒基因組中含有hPF4基因。重組病毒以MOI=10感染傢蠶培養細胞(2×106箇細胞)和傢蠶5齡幼蟲,錶達產物用體外培養的血管內皮細胞測定其生物活性,測得錶達量在傢蠶培養細胞中第3天達到最高值為6.088μg/2×106箇細胞;在蠶體內錶達第5天達到最高值,錶達量明顯高于傢蠶培養細胞。
장인혈소판인자Ⅳ(Human Platelet Factor Ⅳ,간칭hPF4)기인중조우가잠간상병독전이재체pBacPAK8중,획득중조전이재체pBacPAK-PF4,병여선성화병독Bm-BacPAK6 DNA공전염가잠배양세포,재세포내발생동원중조,획득중조병독BacPAK-PF4。Southern잡교결과표명중조병독기인조중함유hPF4기인。중조병독이MOI=10감염가잠배양세포(2×106개세포)화가잠5령유충,표체산물용체외배양적혈관내피세포측정기생물활성,측득표체량재가잠배양세포중제3천체도최고치위6.088μg/2×106개세포;재잠체내표체제5천체도최고치,표체량명현고우가잠배양세포。