南京医科大学学报(自然科学版)
南京醫科大學學報(自然科學版)
남경의과대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NANJING MEDICAL UNIVERSITY
2004年
5期
467-469,514
,共4页
侯敏%刘剑南%姚永伟%褚宏亮%张耀娟%章子豪
侯敏%劉劍南%姚永偉%褚宏亮%張耀娟%章子豪
후민%류검남%요영위%저굉량%장요연%장자호
卫氏肺吸虫%重组抗原%纯化%ELISA
衛氏肺吸蟲%重組抗原%純化%ELISA
위씨폐흡충%중조항원%순화%ELISA
目的:纯化重组细菌Pw-I/pRSET B/BL 21的表达产物肺吸虫重组抗原,复性后以ELISA法检测肺吸虫病患者、其他寄生虫病患者和正常人血清,评价其敏感性、特异性和应用前景.方法:通过分步洗涤及透析对细菌重组蛋白进行初步纯化,进一步做快速液相层析纯化,比较前后两法的纯化效果.初步纯化产物经氧化/还原型谷胱苷肽复性后即为重组蛋白抗原(以下简称重组抗原).用该重组抗原,以ELISA法检测肺吸虫、血吸虫、肝吸虫、囊虫和包虫病患者以及正常人血清中相应抗体,并与卫氏肺吸虫粗抗原做比较.结果:经分步洗涤及透析纯化后的重组抗原纯度已较高,快速液相层析进一步纯化效果不明显.以初步纯化后经复性的重组抗原进行ELISA法检测肺吸虫病患者血清,敏感性为91.07%,与其他寄生虫病患者和正常人血清均无交叉反应;粗抗原检测肺吸虫病患者血清敏感性虽为100%,但与其他寄生虫病患者和正常人血清交叉反应率分别为:血吸虫病11.43%,肝吸虫病4.84%,囊虫病3.22%,包虫病5.88%,正常人为2.5%.结论:研究制备的重组抗原应用于肺吸虫病的免疫诊断特异性较高.
目的:純化重組細菌Pw-I/pRSET B/BL 21的錶達產物肺吸蟲重組抗原,複性後以ELISA法檢測肺吸蟲病患者、其他寄生蟲病患者和正常人血清,評價其敏感性、特異性和應用前景.方法:通過分步洗滌及透析對細菌重組蛋白進行初步純化,進一步做快速液相層析純化,比較前後兩法的純化效果.初步純化產物經氧化/還原型穀胱苷肽複性後即為重組蛋白抗原(以下簡稱重組抗原).用該重組抗原,以ELISA法檢測肺吸蟲、血吸蟲、肝吸蟲、囊蟲和包蟲病患者以及正常人血清中相應抗體,併與衛氏肺吸蟲粗抗原做比較.結果:經分步洗滌及透析純化後的重組抗原純度已較高,快速液相層析進一步純化效果不明顯.以初步純化後經複性的重組抗原進行ELISA法檢測肺吸蟲病患者血清,敏感性為91.07%,與其他寄生蟲病患者和正常人血清均無交扠反應;粗抗原檢測肺吸蟲病患者血清敏感性雖為100%,但與其他寄生蟲病患者和正常人血清交扠反應率分彆為:血吸蟲病11.43%,肝吸蟲病4.84%,囊蟲病3.22%,包蟲病5.88%,正常人為2.5%.結論:研究製備的重組抗原應用于肺吸蟲病的免疫診斷特異性較高.
목적:순화중조세균Pw-I/pRSET B/BL 21적표체산물폐흡충중조항원,복성후이ELISA법검측폐흡충병환자、기타기생충병환자화정상인혈청,평개기민감성、특이성화응용전경.방법:통과분보세조급투석대세균중조단백진행초보순화,진일보주쾌속액상층석순화,비교전후량법적순화효과.초보순화산물경양화/환원형곡광감태복성후즉위중조단백항원(이하간칭중조항원).용해중조항원,이ELISA법검측폐흡충、혈흡충、간흡충、낭충화포충병환자이급정상인혈청중상응항체,병여위씨폐흡충조항원주비교.결과:경분보세조급투석순화후적중조항원순도이교고,쾌속액상층석진일보순화효과불명현.이초보순화후경복성적중조항원진행ELISA법검측폐흡충병환자혈청,민감성위91.07%,여기타기생충병환자화정상인혈청균무교차반응;조항원검측폐흡충병환자혈청민감성수위100%,단여기타기생충병환자화정상인혈청교차반응솔분별위:혈흡충병11.43%,간흡충병4.84%,낭충병3.22%,포충병5.88%,정상인위2.5%.결론:연구제비적중조항원응용우폐흡충병적면역진단특이성교고.