上海第二医科大学学报
上海第二醫科大學學報
상해제이의과대학학보
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS SECONDAE SHANGHAI
2004年
12期
1007-1010
,共4页
邹嫣琼%王英%陈玉英%胡庆沈%李慧%易静
鄒嫣瓊%王英%陳玉英%鬍慶瀋%李慧%易靜
추언경%왕영%진옥영%호경침%리혜%역정
人骨形成蛋白2%加强型绿色荧光蛋白%皮肤成纤维细胞%RT-PCR%免疫组化
人骨形成蛋白2%加彊型綠色熒光蛋白%皮膚成纖維細胞%RT-PCR%免疫組化
인골형성단백2%가강형록색형광단백%피부성섬유세포%RT-PCR%면역조화
目的构建带加强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的人骨形成蛋白2(hBMP2)真核表达载体,观察其在正常人皮肤成纤维细胞中的表达情况.方法构建携带hBMP2和EGFP基因的真核表达载体pcDNA3-hBMP2-IRES-EGFP(pcBE),将其转染NIH3T3细胞和正常人皮肤成纤维细胞后,采用RT-PCR和免疫组化染色方法分别检测人BMP2和EGFP基因在mRNA和蛋白质水平上的表达情况.结果转染后的NIH3T3和正常人皮肤成纤维细胞均能转录人BMP2 mRNA和表达人BMP2蛋白,同时显示绿色荧光.结论pcBE真核表达载体可在正常人皮肤成纤维细胞内有效表达人BMP2蛋白,并以其荧光报告基因起示踪作用.
目的構建帶加彊型綠色熒光蛋白(EGFP)基因的人骨形成蛋白2(hBMP2)真覈錶達載體,觀察其在正常人皮膚成纖維細胞中的錶達情況.方法構建攜帶hBMP2和EGFP基因的真覈錶達載體pcDNA3-hBMP2-IRES-EGFP(pcBE),將其轉染NIH3T3細胞和正常人皮膚成纖維細胞後,採用RT-PCR和免疫組化染色方法分彆檢測人BMP2和EGFP基因在mRNA和蛋白質水平上的錶達情況.結果轉染後的NIH3T3和正常人皮膚成纖維細胞均能轉錄人BMP2 mRNA和錶達人BMP2蛋白,同時顯示綠色熒光.結論pcBE真覈錶達載體可在正常人皮膚成纖維細胞內有效錶達人BMP2蛋白,併以其熒光報告基因起示蹤作用.
목적구건대가강형록색형광단백(EGFP)기인적인골형성단백2(hBMP2)진핵표체재체,관찰기재정상인피부성섬유세포중적표체정황.방법구건휴대hBMP2화EGFP기인적진핵표체재체pcDNA3-hBMP2-IRES-EGFP(pcBE),장기전염NIH3T3세포화정상인피부성섬유세포후,채용RT-PCR화면역조화염색방법분별검측인BMP2화EGFP기인재mRNA화단백질수평상적표체정황.결과전염후적NIH3T3화정상인피부성섬유세포균능전록인BMP2 mRNA화표체인BMP2단백,동시현시록색형광.결론pcBE진핵표체재체가재정상인피부성섬유세포내유효표체인BMP2단백,병이기형광보고기인기시종작용.
