郑州大学学报（医学版）
鄭州大學學報（醫學版）
정주대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2005年
3期
380-382
,共3页
赵国强%胡军%冷弘%王岚%陈宗德
趙國彊%鬍軍%冷弘%王嵐%陳宗德
조국강%호군%랭홍%왕람%진종덕
B19%荧光定量PCR%检测
B19%熒光定量PCR%檢測
B19%형광정량PCR%검측
目的:建立采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测人微小病毒B19的方法.方法:根据B19病毒VP2基因序列,设计并合成引物和荧光标记探针.将PCR扩增的B19病毒VP2区基因片段克隆入pGEM-T载体,重组质粒pGEM-T-VP2经筛选、鉴定后,作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测;对15例B19病毒感染血标本和几种其他病毒进行PCR测定.结果:应用重组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系;与定量对照曲线比较计算,15例B19病毒感染标本中B19拷贝数为4.8×10 5μl-1～8.7×10 8μl-1;对其他几种病毒的扩增均无信号出现.结论:成功建立了检测B19的荧光定量PCR方法,较常规PCR技术更为简便、快速、准确,有很好的应用前景和研究价值.
目的:建立採用熒光定量聚閤酶鏈反應(FQ-PCR)檢測人微小病毒B19的方法.方法:根據B19病毒VP2基因序列,設計併閤成引物和熒光標記探針.將PCR擴增的B19病毒VP2區基因片段剋隆入pGEM-T載體,重組質粒pGEM-T-VP2經篩選、鑒定後,作為暘性模闆,用于標準麯線的製定和樣品檢測;對15例B19病毒感染血標本和幾種其他病毒進行PCR測定.結果:應用重組質粒製作的定量麯線循環閾值與模闆濃度具有良好的線性關繫;與定量對照麯線比較計算,15例B19病毒感染標本中B19拷貝數為4.8×10 5μl-1～8.7×10 8μl-1;對其他幾種病毒的擴增均無信號齣現.結論:成功建立瞭檢測B19的熒光定量PCR方法,較常規PCR技術更為簡便、快速、準確,有很好的應用前景和研究價值.
목적:건립채용형광정량취합매련반응(FQ-PCR)검측인미소병독B19적방법.방법:근거B19병독VP2기인서렬,설계병합성인물화형광표기탐침.장PCR확증적B19병독VP2구기인편단극륭입pGEM-T재체,중조질립pGEM-T-VP2경사선、감정후,작위양성모판,용우표준곡선적제정화양품검측;대15례B19병독감염혈표본화궤충기타병독진행PCR측정.결과:응용중조질립제작적정량곡선순배역치여모판농도구유량호적선성관계;여정량대조곡선비교계산,15례B19병독감염표본중B19고패수위4.8×10 5μl-1～8.7×10 8μl-1;대기타궤충병독적확증균무신호출현.결론:성공건립료검측B19적형광정량PCR방법,교상규PCR기술경위간편、쾌속、준학,유흔호적응용전경화연구개치.
