科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2007年
4期
404-409
,共6页
马晶晶%李良璧%荆玉祥%匡廷云
馬晶晶%李良璧%荊玉祥%劻廷雲
마정정%리량벽%형옥상%광정운
Cyt%b559%定点突变%PS Ⅱ%叶绿体转化%衣藻
Cyt%b559%定點突變%PS Ⅱ%葉綠體轉化%衣藻
Cyt%b559%정점돌변%PS Ⅱ%협록체전화%의조
为研究细胞色素b559 (Cyt b559)在光合系统中的功能,采用大引物定点突变技术,将衣藻叶绿体Cyt b559α亚基(psbE基因编码)中与组氨酸(His23)相邻的氨基酸残基丝氨酸(Ser24)定点突变为苯丙氨酸(Phe),获得突变体S24F.对突变体的生理生化分析表明,S24F既能进行光合自养也能进行光合异养,但是在自养和异养条件下,其生长速率比对照慢;S24F的PSⅡ放氧活性约为野生衣藻细胞的71%,S24F的光系统Ⅱ(PSⅡ)光化学效率Fv/Fm比野生型对照低约0.23.此外,相比野生型对照,突变体S24F对强光更加敏感;SDS-PAGE和Western杂交的结果表明,对Cyt b559 (亚基中Ser24的定点突变影响了Cyt b559 (亚基及其他膜蛋白,如LHCⅡ和PsbO等的表达.上述结果说明,虽然Ser24残基并不参与血红素配位,但其对维持PSⅡ的活性具有重要作用.
為研究細胞色素b559 (Cyt b559)在光閤繫統中的功能,採用大引物定點突變技術,將衣藻葉綠體Cyt b559α亞基(psbE基因編碼)中與組氨痠(His23)相鄰的氨基痠殘基絲氨痠(Ser24)定點突變為苯丙氨痠(Phe),穫得突變體S24F.對突變體的生理生化分析錶明,S24F既能進行光閤自養也能進行光閤異養,但是在自養和異養條件下,其生長速率比對照慢;S24F的PSⅡ放氧活性約為野生衣藻細胞的71%,S24F的光繫統Ⅱ(PSⅡ)光化學效率Fv/Fm比野生型對照低約0.23.此外,相比野生型對照,突變體S24F對彊光更加敏感;SDS-PAGE和Western雜交的結果錶明,對Cyt b559 (亞基中Ser24的定點突變影響瞭Cyt b559 (亞基及其他膜蛋白,如LHCⅡ和PsbO等的錶達.上述結果說明,雖然Ser24殘基併不參與血紅素配位,但其對維持PSⅡ的活性具有重要作用.
위연구세포색소b559 (Cyt b559)재광합계통중적공능,채용대인물정점돌변기술,장의조협록체Cyt b559α아기(psbE기인편마)중여조안산(His23)상린적안기산잔기사안산(Ser24)정점돌변위분병안산(Phe),획득돌변체S24F.대돌변체적생리생화분석표명,S24F기능진행광합자양야능진행광합이양,단시재자양화이양조건하,기생장속솔비대조만;S24F적PSⅡ방양활성약위야생의조세포적71%,S24F적광계통Ⅱ(PSⅡ)광화학효솔Fv/Fm비야생형대조저약0.23.차외,상비야생형대조,돌변체S24F대강광경가민감;SDS-PAGE화Western잡교적결과표명,대Cyt b559 (아기중Ser24적정점돌변영향료Cyt b559 (아기급기타막단백,여LHCⅡ화PsbO등적표체.상술결과설명,수연Ser24잔기병불삼여혈홍소배위,단기대유지PSⅡ적활성구유중요작용.
