微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2007年
5期
785-789
,共5页
周峻岗%张厚程%王鹏%祁庆生
週峻崗%張厚程%王鵬%祁慶生
주준강%장후정%왕붕%기경생
酿酒酵母%糖基化%甘露糖蛋白%甘露糖基转移酶
釀酒酵母%糖基化%甘露糖蛋白%甘露糖基轉移酶
양주효모%당기화%감로당단백%감로당기전이매
酿酒酵母糖蛋白的N-糖基化经过高尔基体的修饰后形成聚合度约150-200的甘露寡糖,高尔基体N-糖基化的糖基转移酶Mnn1p和Och1p在甘露寡糖的形成过程中起关键作用.通过同源重组置换敲除了酵母中的MNN1和OCH1基因阻断高尔基体N-糖基化修饰,分离纯化了mnn1 och1突变株中的N-糖蛋白,糖酰胺酶PNGase F酶解释放的N-糖链经过2-氨基吡啶衍生后,利用HPLC和MALDI TOF/MS结合的方法分析了突变株糖蛋白上的N-糖链.结果显示mnn1 och1突变株中的糖蛋白的N-糖链为结构单一的糖链,分子量为1794.66,推测为Man8GlcNAc2.
釀酒酵母糖蛋白的N-糖基化經過高爾基體的脩飾後形成聚閤度約150-200的甘露寡糖,高爾基體N-糖基化的糖基轉移酶Mnn1p和Och1p在甘露寡糖的形成過程中起關鍵作用.通過同源重組置換敲除瞭酵母中的MNN1和OCH1基因阻斷高爾基體N-糖基化脩飾,分離純化瞭mnn1 och1突變株中的N-糖蛋白,糖酰胺酶PNGase F酶解釋放的N-糖鏈經過2-氨基吡啶衍生後,利用HPLC和MALDI TOF/MS結閤的方法分析瞭突變株糖蛋白上的N-糖鏈.結果顯示mnn1 och1突變株中的糖蛋白的N-糖鏈為結構單一的糖鏈,分子量為1794.66,推測為Man8GlcNAc2.
양주효모당단백적N-당기화경과고이기체적수식후형성취합도약150-200적감로과당,고이기체N-당기화적당기전이매Mnn1p화Och1p재감로과당적형성과정중기관건작용.통과동원중조치환고제료효모중적MNN1화OCH1기인조단고이기체N-당기화수식,분리순화료mnn1 och1돌변주중적N-당단백,당선알매PNGase F매해석방적N-당련경과2-안기필정연생후,이용HPLC화MALDI TOF/MS결합적방법분석료돌변주당단백상적N-당련.결과현시mnn1 och1돌변주중적당단백적N-당련위결구단일적당련,분자량위1794.66,추측위Man8GlcNAc2.
