生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2008年
2期
155-158
,共4页
单萍%许凌峰%刘学琦%郝宁%周义发%李雪梅
單萍%許凌峰%劉學琦%郝寧%週義髮%李雪梅
단평%허릉봉%류학기%학저%주의발%리설매
人源CLP%表达%纯化%生化特性
人源CLP%錶達%純化%生化特性
인원CLP%표체%순화%생화특성
目的:为进一步研究CLP(coaetosin-like protein)与5'-脂氧合酶、肌动蛋白的相互作用机制及功能,开展CLP克隆表达、分离纯化研究,以得到高纯度的CLP,并对其生物化学特性进行分析测定.方法:从人的胎肝cDNA文库中经PCR扩增得到CLP基因,克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中并获得高效表达,经过Glutathione Sepharose 4B亲和层析和Superdex 75分子筛纯化,得到高纯度的CLP;在此基础上进行SDS-PAGE、动态光散射和分析型超速离心等实验,并进一步分析实验结果.结果:CLP在溶液中主要以单体形式呈现;CLP的摩擦率为1.909,证实该蛋白质具有线性化趋势存在的可能性,且线性化程度较高.结论:实验结果揭示了CLP作为线性化蛋白质的可能性,为进一步搭建CLP和丝状肌动蛋白的作用模型奠定了一定的数据基础.
目的:為進一步研究CLP(coaetosin-like protein)與5'-脂氧閤酶、肌動蛋白的相互作用機製及功能,開展CLP剋隆錶達、分離純化研究,以得到高純度的CLP,併對其生物化學特性進行分析測定.方法:從人的胎肝cDNA文庫中經PCR擴增得到CLP基因,剋隆到原覈錶達載體pGEX-6p-1中併穫得高效錶達,經過Glutathione Sepharose 4B親和層析和Superdex 75分子篩純化,得到高純度的CLP;在此基礎上進行SDS-PAGE、動態光散射和分析型超速離心等實驗,併進一步分析實驗結果.結果:CLP在溶液中主要以單體形式呈現;CLP的摩抆率為1.909,證實該蛋白質具有線性化趨勢存在的可能性,且線性化程度較高.結論:實驗結果揭示瞭CLP作為線性化蛋白質的可能性,為進一步搭建CLP和絲狀肌動蛋白的作用模型奠定瞭一定的數據基礎.
목적:위진일보연구CLP(coaetosin-like protein)여5'-지양합매、기동단백적상호작용궤제급공능,개전CLP극륭표체、분리순화연구,이득도고순도적CLP,병대기생물화학특성진행분석측정.방법:종인적태간cDNA문고중경PCR확증득도CLP기인,극륭도원핵표체재체pGEX-6p-1중병획득고효표체,경과Glutathione Sepharose 4B친화층석화Superdex 75분자사순화,득도고순도적CLP;재차기출상진행SDS-PAGE、동태광산사화분석형초속리심등실험,병진일보분석실험결과.결과:CLP재용액중주요이단체형식정현;CLP적마찰솔위1.909,증실해단백질구유선성화추세존재적가능성,차선성화정도교고.결론:실험결과게시료CLP작위선성화단백질적가능성,위진일보탑건CLP화사상기동단백적작용모형전정료일정적수거기출.