中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2007年
3期
254-258
,共5页
马卓娅%汤华%李欣%刘民%吴海东%王晶
馬卓婭%湯華%李訢%劉民%吳海東%王晶
마탁아%탕화%리흔%류민%오해동%왕정
microRNA%肿瘤细胞%寡核苷酸芯片%表达差异
microRNA%腫瘤細胞%寡覈苷痠芯片%錶達差異
microRNA%종류세포%과핵감산심편%표체차이
目的:利用生物芯片技术分析6种不同器官肿瘤细胞中microRNA(miRNA)的表达差异.方法:将210个与已知人类和小鼠miRNA互补的序列(206个miRNA,4个阳性对照)作为探针,点于玻片上制备寡核苷酸芯片.提取肿瘤细胞HeLa(人宫颈癌上皮细胞)、MCF-7(人乳腺癌细胞)、A549(人肺腺癌细胞)、HT-29(人结肠腺癌细胞)、ES-2(人卵巢透明细胞癌)、K562(人慢性髓细胞性白血病细胞)的miRNA,荧光染料Cy3标记,并与制备好的芯片杂交;用ScanArrayTM Express1.0扫描仪扫描荧光信号,采用ScanArray3.0和Cluster3.0软件分析处理扫描结果;Northern blotting和RT-PCR方法对芯片检测结果进行验证.结果:在6种不同器官肿瘤细胞中,检测到115种miRNA存在差异,91种miRNA没有明显差异;其中,miR-21在6种肿瘤细胞表达水平均较高,miR一125b表达水平均较低,let-7不同亚型在6种细胞系中表达水平较低;miR-17-5p和miR一20a呈集簇表达,在卵巢肿瘤ES-2细胞中的表达水平高于其他细胞,乳腺肿瘤细胞系MCF-7和宫颈癌细胞系HeLa的miRNA表达谱聚为一类.Northern blotting检测到miR-17-5p及其前体在K562细胞中均见表达,A549和ES-2细胞中只见较弱的前体表达,MCF-7、HeLa和HT-29中可见明显的前体和较弱的成熟miRNA的表达.RT-PCR检测到miR-17-5p前体在K562细胞中表达水平高于其他几种细胞,在ES-2细胞中的表达量低于K562细胞,同时高于另外4种细胞;miR-21在6种肿瘤细胞中表达水平均较高,在A549细胞中表达最高.结论:应用生物芯片技术检测肿瘤细胞中miRNA的表达差异为进一步探索miRNA与肿瘤间的关系奠定基础.
目的:利用生物芯片技術分析6種不同器官腫瘤細胞中microRNA(miRNA)的錶達差異.方法:將210箇與已知人類和小鼠miRNA互補的序列(206箇miRNA,4箇暘性對照)作為探針,點于玻片上製備寡覈苷痠芯片.提取腫瘤細胞HeLa(人宮頸癌上皮細胞)、MCF-7(人乳腺癌細胞)、A549(人肺腺癌細胞)、HT-29(人結腸腺癌細胞)、ES-2(人卵巢透明細胞癌)、K562(人慢性髓細胞性白血病細胞)的miRNA,熒光染料Cy3標記,併與製備好的芯片雜交;用ScanArrayTM Express1.0掃描儀掃描熒光信號,採用ScanArray3.0和Cluster3.0軟件分析處理掃描結果;Northern blotting和RT-PCR方法對芯片檢測結果進行驗證.結果:在6種不同器官腫瘤細胞中,檢測到115種miRNA存在差異,91種miRNA沒有明顯差異;其中,miR-21在6種腫瘤細胞錶達水平均較高,miR一125b錶達水平均較低,let-7不同亞型在6種細胞繫中錶達水平較低;miR-17-5p和miR一20a呈集簇錶達,在卵巢腫瘤ES-2細胞中的錶達水平高于其他細胞,乳腺腫瘤細胞繫MCF-7和宮頸癌細胞繫HeLa的miRNA錶達譜聚為一類.Northern blotting檢測到miR-17-5p及其前體在K562細胞中均見錶達,A549和ES-2細胞中隻見較弱的前體錶達,MCF-7、HeLa和HT-29中可見明顯的前體和較弱的成熟miRNA的錶達.RT-PCR檢測到miR-17-5p前體在K562細胞中錶達水平高于其他幾種細胞,在ES-2細胞中的錶達量低于K562細胞,同時高于另外4種細胞;miR-21在6種腫瘤細胞中錶達水平均較高,在A549細胞中錶達最高.結論:應用生物芯片技術檢測腫瘤細胞中miRNA的錶達差異為進一步探索miRNA與腫瘤間的關繫奠定基礎.
목적:이용생물심편기술분석6충불동기관종류세포중microRNA(miRNA)적표체차이.방법:장210개여이지인류화소서miRNA호보적서렬(206개miRNA,4개양성대조)작위탐침,점우파편상제비과핵감산심편.제취종류세포HeLa(인궁경암상피세포)、MCF-7(인유선암세포)、A549(인폐선암세포)、HT-29(인결장선암세포)、ES-2(인란소투명세포암)、K562(인만성수세포성백혈병세포)적miRNA,형광염료Cy3표기,병여제비호적심편잡교;용ScanArrayTM Express1.0소묘의소묘형광신호,채용ScanArray3.0화Cluster3.0연건분석처리소묘결과;Northern blotting화RT-PCR방법대심편검측결과진행험증.결과:재6충불동기관종류세포중,검측도115충miRNA존재차이,91충miRNA몰유명현차이;기중,miR-21재6충종류세포표체수평균교고,miR일125b표체수평균교저,let-7불동아형재6충세포계중표체수평교저;miR-17-5p화miR일20a정집족표체,재란소종류ES-2세포중적표체수평고우기타세포,유선종류세포계MCF-7화궁경암세포계HeLa적miRNA표체보취위일류.Northern blotting검측도miR-17-5p급기전체재K562세포중균견표체,A549화ES-2세포중지견교약적전체표체,MCF-7、HeLa화HT-29중가견명현적전체화교약적성숙miRNA적표체.RT-PCR검측도miR-17-5p전체재K562세포중표체수평고우기타궤충세포,재ES-2세포중적표체량저우K562세포,동시고우령외4충세포;miR-21재6충종류세포중표체수평균교고,재A549세포중표체최고.결론:응용생물심편기술검측종류세포중miRNA적표체차이위진일보탐색miRNA여종류간적관계전정기출.
