肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2011年
10期
924-929
,共6页
胡瑜%华东%程之红%吴玉玉%谢其根%王琼瑶%余坚%黄朝晖
鬍瑜%華東%程之紅%吳玉玉%謝其根%王瓊瑤%餘堅%黃朝暉
호유%화동%정지홍%오옥옥%사기근%왕경요%여견%황조휘
癌,肝细胞%DNA甲基化%血浆%分子诊断技术%聚合酶链反应%限制性内切酶%基因,腺瘤性结肠息肉病
癌,肝細胞%DNA甲基化%血漿%分子診斷技術%聚閤酶鏈反應%限製性內切酶%基因,腺瘤性結腸息肉病
암,간세포%DNA갑기화%혈장%분자진단기술%취합매련반응%한제성내절매%기인,선류성결장식육병
目的:建立甲基化敏感性限制性内切酶-定量PCR (methylation-sensitive restriction enzyme-quantitative PCR,MSRE-qPCR)方法,并应用该方法探讨血浆腺瘤性结肠息肉病(adenomatous polyposis coli,APC)基因甲基化检测在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)诊断中的应用价值.方法:用Hha Ⅰ消化DNA样品,qPCR 技术评估酶切效率,建立优化的MSRE-qPCR方法.用MSRE-qPCR法检测45例肝组织(20例HCC及其相应匹配的非癌组织和5例正常肝组织)中APC甲基化水平;应用亚硫酸氢盐测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)对MSRE-qPCR检测结果进行验证,并与甲基化特异性PCR (methylation-specific PCR,MSP)检测方法比较.运用MSRE-qPCR技术检测72例HCC、37例肝良性病变和41例健康志愿者血浆标本的APC甲基化状态.结果:建立的MSRE-qPCR方法可定量检测低至1%的APC甲基化片段.MSRE-qPCR和MSP检测结果均显示,HCC组织中APC基因发生高频率甲基化.MSRE-qPCR检测结果经BSP验证准确无误,且与MSP检测结果具有较好的一致性(Kappa=0.955,P<0.000 1).HCC患者血浆APC甲基化水平高于肝良性病变及健康志愿者(P<0.000 1).血浆APC甲基化分析与血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)联合检测可提高HCC诊断效率.结论:MSRE-qPCR可定量检测APC甲基化水平.血浆APC甲基化分析对于HCC的非侵入性诊断具有重要价值.
目的:建立甲基化敏感性限製性內切酶-定量PCR (methylation-sensitive restriction enzyme-quantitative PCR,MSRE-qPCR)方法,併應用該方法探討血漿腺瘤性結腸息肉病(adenomatous polyposis coli,APC)基因甲基化檢測在肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)診斷中的應用價值.方法:用Hha Ⅰ消化DNA樣品,qPCR 技術評估酶切效率,建立優化的MSRE-qPCR方法.用MSRE-qPCR法檢測45例肝組織(20例HCC及其相應匹配的非癌組織和5例正常肝組織)中APC甲基化水平;應用亞硫痠氫鹽測序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)對MSRE-qPCR檢測結果進行驗證,併與甲基化特異性PCR (methylation-specific PCR,MSP)檢測方法比較.運用MSRE-qPCR技術檢測72例HCC、37例肝良性病變和41例健康誌願者血漿標本的APC甲基化狀態.結果:建立的MSRE-qPCR方法可定量檢測低至1%的APC甲基化片段.MSRE-qPCR和MSP檢測結果均顯示,HCC組織中APC基因髮生高頻率甲基化.MSRE-qPCR檢測結果經BSP驗證準確無誤,且與MSP檢測結果具有較好的一緻性(Kappa=0.955,P<0.000 1).HCC患者血漿APC甲基化水平高于肝良性病變及健康誌願者(P<0.000 1).血漿APC甲基化分析與血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)聯閤檢測可提高HCC診斷效率.結論:MSRE-qPCR可定量檢測APC甲基化水平.血漿APC甲基化分析對于HCC的非侵入性診斷具有重要價值.
목적:건립갑기화민감성한제성내절매-정량PCR (methylation-sensitive restriction enzyme-quantitative PCR,MSRE-qPCR)방법,병응용해방법탐토혈장선류성결장식육병(adenomatous polyposis coli,APC)기인갑기화검측재간세포암(hepatocellular carcinoma,HCC)진단중적응용개치.방법:용Hha Ⅰ소화DNA양품,qPCR 기술평고매절효솔,건립우화적MSRE-qPCR방법.용MSRE-qPCR법검측45례간조직(20례HCC급기상응필배적비암조직화5례정상간조직)중APC갑기화수평;응용아류산경염측서PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)대MSRE-qPCR검측결과진행험증,병여갑기화특이성PCR (methylation-specific PCR,MSP)검측방법비교.운용MSRE-qPCR기술검측72례HCC、37례간량성병변화41례건강지원자혈장표본적APC갑기화상태.결과:건립적MSRE-qPCR방법가정량검측저지1%적APC갑기화편단.MSRE-qPCR화MSP검측결과균현시,HCC조직중APC기인발생고빈솔갑기화.MSRE-qPCR검측결과경BSP험증준학무오,차여MSP검측결과구유교호적일치성(Kappa=0.955,P<0.000 1).HCC환자혈장APC갑기화수평고우간량성병변급건강지원자(P<0.000 1).혈장APC갑기화분석여혈청갑태단백(alpha-fetoprotein,AFP)연합검측가제고HCC진단효솔.결론:MSRE-qPCR가정량검측APC갑기화수평.혈장APC갑기화분석대우HCC적비침입성진단구유중요개치.