东南国防医药
東南國防醫藥
동남국방의약
JOURNAL OF SOUTHEAST CHINA NATIONAL DEFENCE MEDICAL SCIENCE
2011年
6期
481-484
,共4页
孔练花%李军%韩亚萍%刘源%黄祖瑚
孔練花%李軍%韓亞萍%劉源%黃祖瑚
공련화%리군%한아평%류원%황조호
树突状细胞%基因转染,脂质体%T淋巴细胞,细胞毒性
樹突狀細胞%基因轉染,脂質體%T淋巴細胞,細胞毒性
수돌상세포%기인전염,지질체%T림파세포,세포독성
目的 制备转染乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因、人外周血单个核细胞(PBMC)来源的树突状细胞(DC)疫苗,观察HBcAg的表达效率,检测其在体外诱导的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)对HepG2.2.15细胞的杀伤效应.方法 体外诱导并培养DC;将HBcAg基因导入DC,检测HBcAg的表达率;将基因转染后的DC与自体淋巴细胞混合培养,MTT法检测其对HepG2.2.15细胞的杀伤毒力.结果 成功培养了人外周血PBMC来源的DC,并通过脂质体的方法获得表达HBcAg的特异性DC疫苗,脂质体转染后DC的的形态未发生明显变化,CD83表达增加,与对照组比较有显著性差异.HBcAg基因转染DC后72 h的HBcAg表达率为55.8％;MTT法检测特异性细胞毒作用结果显示,试验组效靶比为10∶1、20∶1、40∶1的杀伤率分别为(62.5±4.8)％、(71.8±5.3)％、(81.5±5.0)％,与空转组、未转组比较,均有统计学差异(均P＜0.05).结论 应用阳离子脂质体能有效地将HBcAg基因转染到人PBMC来源的DC,转染HBcAg基因的DC具有诱导CTL体外杀伤HepG2.2.15细胞的作用.
目的 製備轉染乙型肝炎病毒覈心抗原(HBcAg)基因、人外週血單箇覈細胞(PBMC)來源的樹突狀細胞(DC)疫苗,觀察HBcAg的錶達效率,檢測其在體外誘導的細胞毒性T淋巴細胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)對HepG2.2.15細胞的殺傷效應.方法 體外誘導併培養DC;將HBcAg基因導入DC,檢測HBcAg的錶達率;將基因轉染後的DC與自體淋巴細胞混閤培養,MTT法檢測其對HepG2.2.15細胞的殺傷毒力.結果 成功培養瞭人外週血PBMC來源的DC,併通過脂質體的方法穫得錶達HBcAg的特異性DC疫苗,脂質體轉染後DC的的形態未髮生明顯變化,CD83錶達增加,與對照組比較有顯著性差異.HBcAg基因轉染DC後72 h的HBcAg錶達率為55.8％;MTT法檢測特異性細胞毒作用結果顯示,試驗組效靶比為10∶1、20∶1、40∶1的殺傷率分彆為(62.5±4.8)％、(71.8±5.3)％、(81.5±5.0)％,與空轉組、未轉組比較,均有統計學差異(均P＜0.05).結論 應用暘離子脂質體能有效地將HBcAg基因轉染到人PBMC來源的DC,轉染HBcAg基因的DC具有誘導CTL體外殺傷HepG2.2.15細胞的作用.
목적 제비전염을형간염병독핵심항원(HBcAg)기인、인외주혈단개핵세포(PBMC)래원적수돌상세포(DC)역묘,관찰HBcAg적표체효솔,검측기재체외유도적세포독성T림파세포(cytotoxic T lymphocytes,CTL)대HepG2.2.15세포적살상효응.방법 체외유도병배양DC;장HBcAg기인도입DC,검측HBcAg적표체솔;장기인전염후적DC여자체림파세포혼합배양,MTT법검측기대HepG2.2.15세포적살상독력.결과 성공배양료인외주혈PBMC래원적DC,병통과지질체적방법획득표체HBcAg적특이성DC역묘,지질체전염후DC적적형태미발생명현변화,CD83표체증가,여대조조비교유현저성차이.HBcAg기인전염DC후72 h적HBcAg표체솔위55.8％;MTT법검측특이성세포독작용결과현시,시험조효파비위10∶1、20∶1、40∶1적살상솔분별위(62.5±4.8)％、(71.8±5.3)％、(81.5±5.0)％,여공전조、미전조비교,균유통계학차이(균P＜0.05).결론 응용양리자지질체능유효지장HBcAg기인전염도인PBMC래원적DC,전염HBcAg기인적DC구유유도CTL체외살상HepG2.2.15세포적작용.
