畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2011年
10期
1351-1356
,共6页
孙燕%王鲜忠%吴建云%朱峰伟%向阳%杨炜蓉%张家骅
孫燕%王鮮忠%吳建雲%硃峰偉%嚮暘%楊煒蓉%張傢驊
손연%왕선충%오건운%주봉위%향양%양위용%장가화
FSH%支持细胞%GDNF蛋白%信号传导
FSH%支持細胞%GDNF蛋白%信號傳導
FSH%지지세포%GDNF단백%신호전도
本研究旨在阐明FSH调节睾丸支持细胞GDNF表达的信号机制.以体外培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过加入不同信号通路因子,采用RT-PCR和Western blot等方法研究了FSH对支持细胞GDNF表达的调节.结果:(1)FSH(50 ng· mL-1)处理支持细胞,可迅速激活MEK激酶,随着FSH刺激时间的延长,ERKl/2活性逐渐升高(0～30 min)；(2)dbcAMP(100 μmol·L-1)同样能迅速激活MEK激酶,诱导GDNF蛋白、mRNA的表达；ERK1/2活性随dbcAMP刺激时间的延长逐渐升高(0～30 min)；(3)加入MEK1/2的抑制剂U0126和PKA的抑制剂H89,则显著抑制了FSH对GDNF的激活作用,GDNF蛋白、mRNA和活性明显下降；(4)加入PKA的抑制剂H89(10 μmol·L-1),则明显抑制了FSH诱导的ERK1/2磷酸化的激活作用.结果表明,FSH可通过cAMP-PKA激活ERK级联调节支持细胞GDNF的表达.
本研究旨在闡明FSH調節睪汍支持細胞GDNF錶達的信號機製.以體外培養的仔豬睪汍支持細胞為試驗材料,通過加入不同信號通路因子,採用RT-PCR和Western blot等方法研究瞭FSH對支持細胞GDNF錶達的調節.結果:(1)FSH(50 ng· mL-1)處理支持細胞,可迅速激活MEK激酶,隨著FSH刺激時間的延長,ERKl/2活性逐漸升高(0～30 min)；(2)dbcAMP(100 μmol·L-1)同樣能迅速激活MEK激酶,誘導GDNF蛋白、mRNA的錶達；ERK1/2活性隨dbcAMP刺激時間的延長逐漸升高(0～30 min)；(3)加入MEK1/2的抑製劑U0126和PKA的抑製劑H89,則顯著抑製瞭FSH對GDNF的激活作用,GDNF蛋白、mRNA和活性明顯下降；(4)加入PKA的抑製劑H89(10 μmol·L-1),則明顯抑製瞭FSH誘導的ERK1/2燐痠化的激活作用.結果錶明,FSH可通過cAMP-PKA激活ERK級聯調節支持細胞GDNF的錶達.
본연구지재천명FSH조절고환지지세포GDNF표체적신호궤제.이체외배양적자저고환지지세포위시험재료,통과가입불동신호통로인자,채용RT-PCR화Western blot등방법연구료FSH대지지세포GDNF표체적조절.결과:(1)FSH(50 ng· mL-1)처리지지세포,가신속격활MEK격매,수착FSH자격시간적연장,ERKl/2활성축점승고(0～30 min)；(2)dbcAMP(100 μmol·L-1)동양능신속격활MEK격매,유도GDNF단백、mRNA적표체；ERK1/2활성수dbcAMP자격시간적연장축점승고(0～30 min)；(3)가입MEK1/2적억제제U0126화PKA적억제제H89,칙현저억제료FSH대GDNF적격활작용,GDNF단백、mRNA화활성명현하강；(4)가입PKA적억제제H89(10 μmol·L-1),칙명현억제료FSH유도적ERK1/2린산화적격활작용.결과표명,FSH가통과cAMP-PKA격활ERK급련조절지지세포GDNF적표체.
