中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
4期
601-607
,共7页
毕娟娟%何林%余音%郭倩%叶秀峰
畢娟娟%何林%餘音%郭倩%葉秀峰
필연연%하림%여음%곽천%협수봉
熊果酸%内皮细胞%自吞噬作用%细胞凋亡
熊果痠%內皮細胞%自吞噬作用%細胞凋亡
웅과산%내피세포%자탄서작용%세포조망
目的:研究自噬在熊果酸诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤中的作用.方法:体外培养HUVECs,运用不同浓度的熊果酸处理36 h,采用MTT法检测HUVECs增殖率的变化;透射电镜观察细胞超微结构的改变;单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色观察熊果酸对HUVECs自噬表达水平的影响;Western blotting检测微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)及自噬相关蛋白Beclin-1的变化;RT-PCR检测LC3及Beclin-1 mRNA的变化;流式细胞术检测自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)抑制自噬前后经熊果酸处理的HUVECs凋亡率的变化.结果:熊果酸抑制HUVECs增殖并呈剂量依赖性;熊果酸可诱导HUVECs产生自噬:透射电镜和MDC染色均显示HUVECs经熊果酸处理后自噬囊泡明显增加且自噬在基因及蛋白水平的表达均增加;3-MA与熊果酸联合作用于HUVECs时抑制了熊果酸诱导的HUVECs自噬空泡的积聚并且可明显促进HUVECs凋亡.结论:熊果酸抑制HUVECs增殖,并诱导其发生自噬,自噬在此过程中对HUVECs起保护作用.自噬抑制剂3-MA能够增强熊果酸诱导的HUVECs的增殖抑制作用并且促进HUVECs发生凋亡.
目的:研究自噬在熊果痠誘導的人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)損傷中的作用.方法:體外培養HUVECs,運用不同濃度的熊果痠處理36 h,採用MTT法檢測HUVECs增殖率的變化;透射電鏡觀察細胞超微結構的改變;單丹磺酰尸胺(MDC)熒光染色觀察熊果痠對HUVECs自噬錶達水平的影響;Western blotting檢測微管相關蛋白輕鏈3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)及自噬相關蛋白Beclin-1的變化;RT-PCR檢測LC3及Beclin-1 mRNA的變化;流式細胞術檢測自噬抑製劑3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)抑製自噬前後經熊果痠處理的HUVECs凋亡率的變化.結果:熊果痠抑製HUVECs增殖併呈劑量依賴性;熊果痠可誘導HUVECs產生自噬:透射電鏡和MDC染色均顯示HUVECs經熊果痠處理後自噬囊泡明顯增加且自噬在基因及蛋白水平的錶達均增加;3-MA與熊果痠聯閤作用于HUVECs時抑製瞭熊果痠誘導的HUVECs自噬空泡的積聚併且可明顯促進HUVECs凋亡.結論:熊果痠抑製HUVECs增殖,併誘導其髮生自噬,自噬在此過程中對HUVECs起保護作用.自噬抑製劑3-MA能夠增彊熊果痠誘導的HUVECs的增殖抑製作用併且促進HUVECs髮生凋亡.
목적:연구자서재웅과산유도적인제정맥내피세포(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)손상중적작용.방법:체외배양HUVECs,운용불동농도적웅과산처리36 h,채용MTT법검측HUVECs증식솔적변화;투사전경관찰세포초미결구적개변;단단광선시알(MDC)형광염색관찰웅과산대HUVECs자서표체수평적영향;Western blotting검측미관상관단백경련3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)급자서상관단백Beclin-1적변화;RT-PCR검측LC3급Beclin-1 mRNA적변화;류식세포술검측자서억제제3-갑기선표령(3-methyladenine,3-MA)억제자서전후경웅과산처리적HUVECs조망솔적변화.결과:웅과산억제HUVECs증식병정제량의뢰성;웅과산가유도HUVECs산생자서:투사전경화MDC염색균현시HUVECs경웅과산처리후자서낭포명현증가차자서재기인급단백수평적표체균증가;3-MA여웅과산연합작용우HUVECs시억제료웅과산유도적HUVECs자서공포적적취병차가명현촉진HUVECs조망.결론:웅과산억제HUVECs증식,병유도기발생자서,자서재차과정중대HUVECs기보호작용.자서억제제3-MA능구증강웅과산유도적HUVECs적증식억제작용병차촉진HUVECs발생조망.
