禽白血病病毒衣壳蛋白p27基因的原核表达及多克隆抗体的制备
금백혈병병독의각단백p27기인적원핵표체급다극륭항체적제비
Expression of Capsid Protein p27 Gene of Avian Leucosis Virus and Preparation of Multiclonal Antibodies Against Recombinant p27 Protein
  • 万方数据
    中国家禽 중국가금
    CHINA POULTRY
    2012年 9期 13-16 ,共4页

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    금백혈병%p27기인%원핵표체%다극륭항체
    从J亚群禽白血病病毒(ALV-J) HB09JY03株感染的DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出约720 bp的gag-p27基因片段,克隆至pMD18-T载体.鉴定正确后,将该片段克隆至pET-30a(+)原核表达载体,经IPTG诱导表达.表达产物经His TrapTM HP纯化后,测蛋白浓度达到9mg/mL.用兔抗自然p27蛋白阳性血清进行Western blot检测,表明重组p27蛋白有抗原反应活性.免疫新西兰大白兔后,产生的抗体与禽白血病全病毒抗原可以发生特异性反应.所制备的重组p27蛋白和多克隆抗体将在ALV的抗原分析、血清学诊断等方面有着重要的应用价值.
    종J아군금백혈병병독(ALV-J) HB09JY03주감염적DF-1세포적동융렬해액중제취DNA,통과PCR방법확증출약720 bp적gag-p27기인편단,극륭지pMD18-T재체.감정정학후,장해편단극륭지pET-30a(+)원핵표체재체,경IPTG유도표체.표체산물경His TrapTM HP순화후,측단백농도체도9mg/mL.용토항자연p27단백양성혈청진행Western blot검측,표명중조p27단백유항원반응활성.면역신서란대백토후,산생적항체여금백혈병전병독항원가이발생특이성반응.소제비적중조p27단백화다극륭항체장재ALV적항원분석、혈청학진단등방면유착중요적응용개치.
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