海南医学院学报
海南醫學院學報
해남의학원학보
2003年
2期
65-71,83
,共8页
李孟森%李平风%杨非易%杜国光%李刚
李孟森%李平風%楊非易%杜國光%李剛
리맹삼%리평풍%양비역%두국광%리강
甲胎蛋白类%AFP受体%肿瘤%肝%细胞增殖
甲胎蛋白類%AFP受體%腫瘤%肝%細胞增殖
갑태단백류%AFP수체%종류%간%세포증식
目的:观察甲胎蛋白促肿瘤细胞增殖的信号转导方式.方法:用从人脐带血清中提取的甲胎蛋白,作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,运用MTT染色计数法,流式细胞仪测定细胞周期和3H-脱氧胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)参入法等指标检测细胞增殖状况;放射受体分析细胞膜上甲胎蛋白受体存在和数目;免疫结合法检测细胞内cAMP浓度;Western blot分析P21nm蛋白的表达.结果:甲胎蛋白(10~80 mg@L-1)作用24 h后,人肝癌Bel7402细胞有不同程度的促增殖作用;在人肝癌Bel7402细胞膜上存在2种不同的解离平衡常数(Kd)的甲胎蛋白受体,Kd分别为Kd1=1.3×10-9mol@L-1(89400位点/细胞)和Kd2=9.9×10-8mol@L-1(582 000位点/细胞).AFP能显著提高Bel7402细胞内的cAMP浓度,对P21ras的表达也有明显的促进作用.甲胎蛋白的单克隆抗体能阻断这种作用.结论:甲胎蛋白具有促人肝癌Bel7402细胞增殖的作用,这种作用是由受体介导的cAMP信号转导途径实现的.
目的:觀察甲胎蛋白促腫瘤細胞增殖的信號轉導方式.方法:用從人臍帶血清中提取的甲胎蛋白,作用于體外培養的人肝癌Bel7402細胞,運用MTT染色計數法,流式細胞儀測定細胞週期和3H-脫氧胸腺嘧啶覈苷(3H-TdR)參入法等指標檢測細胞增殖狀況;放射受體分析細胞膜上甲胎蛋白受體存在和數目;免疫結閤法檢測細胞內cAMP濃度;Western blot分析P21nm蛋白的錶達.結果:甲胎蛋白(10~80 mg@L-1)作用24 h後,人肝癌Bel7402細胞有不同程度的促增殖作用;在人肝癌Bel7402細胞膜上存在2種不同的解離平衡常數(Kd)的甲胎蛋白受體,Kd分彆為Kd1=1.3×10-9mol@L-1(89400位點/細胞)和Kd2=9.9×10-8mol@L-1(582 000位點/細胞).AFP能顯著提高Bel7402細胞內的cAMP濃度,對P21ras的錶達也有明顯的促進作用.甲胎蛋白的單剋隆抗體能阻斷這種作用.結論:甲胎蛋白具有促人肝癌Bel7402細胞增殖的作用,這種作用是由受體介導的cAMP信號轉導途徑實現的.
목적:관찰갑태단백촉종류세포증식적신호전도방식.방법:용종인제대혈청중제취적갑태단백,작용우체외배양적인간암Bel7402세포,운용MTT염색계수법,류식세포의측정세포주기화3H-탈양흉선밀정핵감(3H-TdR)삼입법등지표검측세포증식상황;방사수체분석세포막상갑태단백수체존재화수목;면역결합법검측세포내cAMP농도;Western blot분석P21nm단백적표체.결과:갑태단백(10~80 mg@L-1)작용24 h후,인간암Bel7402세포유불동정도적촉증식작용;재인간암Bel7402세포막상존재2충불동적해리평형상수(Kd)적갑태단백수체,Kd분별위Kd1=1.3×10-9mol@L-1(89400위점/세포)화Kd2=9.9×10-8mol@L-1(582 000위점/세포).AFP능현저제고Bel7402세포내적cAMP농도,대P21ras적표체야유명현적촉진작용.갑태단백적단극륭항체능조단저충작용.결론:갑태단백구유촉인간암Bel7402세포증식적작용,저충작용시유수체개도적cAMP신호전도도경실현적.