中国生化药物杂志
中國生化藥物雜誌
중국생화약물잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS
2008年
2期
77-80
,共4页
人线粒体色氨酰-tRNA合成酶%表达%亲和纯化%包涵体
人線粒體色氨酰-tRNA閤成酶%錶達%親和純化%包涵體
인선립체색안선-tRNA합성매%표체%친화순화%포함체
目的 优化人线粒体色氨酰-tRNA合成酶(hmtTrpRS)的表达条件.方法 构建表达载体pET-24a(+)-hmtTrpRS,转化到大肠杆菌 BL21-Codonplus(DE3)-RIL中.分析异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导浓度、诱导时间和诱导温度对hmtTrpRS表达的影响.结果 确定IPTG浓度为0.1 mmol/L,30℃诱导4 h,为诱导蛋白表达较合适条件.同时利用特异性的Ni亲和柱色谱纯化了目的蛋白.结论 获得较合适的表达务件,并纯化得到较高纯度的hmtTrpRS,为以后该酶结构、功能的研究奠定了基础.
目的 優化人線粒體色氨酰-tRNA閤成酶(hmtTrpRS)的錶達條件.方法 構建錶達載體pET-24a(+)-hmtTrpRS,轉化到大腸桿菌 BL21-Codonplus(DE3)-RIL中.分析異丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導濃度、誘導時間和誘導溫度對hmtTrpRS錶達的影響.結果 確定IPTG濃度為0.1 mmol/L,30℃誘導4 h,為誘導蛋白錶達較閤適條件.同時利用特異性的Ni親和柱色譜純化瞭目的蛋白.結論 穫得較閤適的錶達務件,併純化得到較高純度的hmtTrpRS,為以後該酶結構、功能的研究奠定瞭基礎.
목적 우화인선립체색안선-tRNA합성매(hmtTrpRS)적표체조건.방법 구건표체재체pET-24a(+)-hmtTrpRS,전화도대장간균 BL21-Codonplus(DE3)-RIL중.분석이병기류대β-D-반유당감(IPTG)유도농도、유도시간화유도온도대hmtTrpRS표체적영향.결과 학정IPTG농도위0.1 mmol/L,30℃유도4 h,위유도단백표체교합괄조건.동시이용특이성적Ni친화주색보순화료목적단백.결론 획득교합괄적표체무건,병순화득도교고순도적hmtTrpRS,위이후해매결구、공능적연구전정료기출.
