中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2006年
2期
76-81
,共6页
张明生%周云峰%谢丛华%张文杰%周福祥%屈雪菊
張明生%週雲峰%謝叢華%張文傑%週福祥%屈雪菊
장명생%주운봉%사총화%장문걸%주복상%굴설국
信号传递%结肠肿瘤%shRNA%脱噬作用
信號傳遞%結腸腫瘤%shRNA%脫噬作用
신호전체%결장종류%shRNA%탈서작용
目的探讨细胞信号传导子和转录激活子6(STAT)信号传导通路与结肠癌细胞凋亡的关系.方法构建4个STAT6特异的shRNA质粒载体,应用阳离子脂质体瞬时转染人结肠癌细胞HT-29,以阻断Stat6信号通路;分别用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测STAT6 mRNA表达和运用流式细胞术检测磷酸化STAT6蛋白(pSTAT6)表达来筛选有效的小发夹RNA(shRNA);运用流式细胞术分析细胞凋亡变化;RT-PCR和Western印迹观察Bcl-2和Bax基因表达.结果成功构建并筛选出两个STAT6特异的shRNA质粒载体;STAT6基因沉默的结肠癌细胞中凋亡细胞明显增加,空白对照组细胞早期凋亡率为0.4%,pshRNA-STAT6-1组和pshRNA-STAT6-4组分别为13.0%和8.8%(P＜0.05);Stat6信号通路被阻断的结肠癌细胞中Bcl-2基因表达明显减少,而Bax蛋白基因表达明显增多(P＜0.01).结论 Stat6信号传导通路能抑制结肠癌细胞凋亡,可能是通过调节Bcl-2和Bax基因的表达发挥作用.
目的探討細胞信號傳導子和轉錄激活子6(STAT)信號傳導通路與結腸癌細胞凋亡的關繫.方法構建4箇STAT6特異的shRNA質粒載體,應用暘離子脂質體瞬時轉染人結腸癌細胞HT-29,以阻斷Stat6信號通路;分彆用逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測STAT6 mRNA錶達和運用流式細胞術檢測燐痠化STAT6蛋白(pSTAT6)錶達來篩選有效的小髮夾RNA(shRNA);運用流式細胞術分析細胞凋亡變化;RT-PCR和Western印跡觀察Bcl-2和Bax基因錶達.結果成功構建併篩選齣兩箇STAT6特異的shRNA質粒載體;STAT6基因沉默的結腸癌細胞中凋亡細胞明顯增加,空白對照組細胞早期凋亡率為0.4%,pshRNA-STAT6-1組和pshRNA-STAT6-4組分彆為13.0%和8.8%(P＜0.05);Stat6信號通路被阻斷的結腸癌細胞中Bcl-2基因錶達明顯減少,而Bax蛋白基因錶達明顯增多(P＜0.01).結論 Stat6信號傳導通路能抑製結腸癌細胞凋亡,可能是通過調節Bcl-2和Bax基因的錶達髮揮作用.
목적탐토세포신호전도자화전록격활자6(STAT)신호전도통로여결장암세포조망적관계.방법구건4개STAT6특이적shRNA질립재체,응용양리자지질체순시전염인결장암세포HT-29,이조단Stat6신호통로;분별용역전록취합매련반응(RT-PCR)방법검측STAT6 mRNA표체화운용류식세포술검측린산화STAT6단백(pSTAT6)표체래사선유효적소발협RNA(shRNA);운용류식세포술분석세포조망변화;RT-PCR화Western인적관찰Bcl-2화Bax기인표체.결과성공구건병사선출량개STAT6특이적shRNA질립재체;STAT6기인침묵적결장암세포중조망세포명현증가,공백대조조세포조기조망솔위0.4%,pshRNA-STAT6-1조화pshRNA-STAT6-4조분별위13.0%화8.8%(P＜0.05);Stat6신호통로피조단적결장암세포중Bcl-2기인표체명현감소,이Bax단백기인표체명현증다(P＜0.01).결론 Stat6신호전도통로능억제결장암세포조망,가능시통과조절Bcl-2화Bax기인적표체발휘작용.
