程序死亡蛋白1基因的克隆及原核表达
정서사망단백1기인적극륭급원핵표체
Cloning of PD-1 gene and its prokaryotic expression in Escherichia coli
  • 万方数据
    中华实验和临床病毒学杂志 중화실험화림상병독학잡지
    CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL AND CLINICAL VIROLOGY
    2008年 1期 33-35 ,共3页

    陈斯勇%关坤萍%郭敏卓%伊瑶%贾志远%余陶%郭瑜%毕胜利

    진사용%관곤평%곽민탁%이요%가지원%여도%곽유%필성리

    程序死亡蛋白1%逆转录聚合酶链反应%基因%克隆,分子 程序死亡蛋白1%逆轉錄聚閤酶鏈反應%基因%剋隆,分子
    정서사망단백1%역전록취합매련반응%기인%극륭,분자
    目的 克隆人程序死亡蛋白(PD-1)基因并构建PD-1蛋白的原核表达质粒,在大肠埃希菌中进行表达.方法 用RT-PCR的方法从慢性乙肝患者外周血淋巴细胞总RNA中逆转录得到PD-1基因的cDNA,构建PD-1基因的原核表达质粒,在大肠埃希菌BL21(DE3)中进行表达并纯化.用SDS-PAGE、DNA测序、氨基酸测序等方法对表达蛋白进行鉴定.结果 克隆到PD-1基因编码区全长序列cDNA,经DNA测序与已报道的序列同源性达99.8%.构建得到PD-1的原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达,纯化获得纯度较高的PD-1蛋白.氨基酸测序证明表达蛋白的正确性.结论 成功克隆人PD-1基因,在大肠埃希菌中获得表达,得到纯化的PD-1蛋白,为进一步研究PD-1蛋白的功能及应用打下基础.
    목적 극륭인정서사망단백(PD-1)기인병구건PD-1단백적원핵표체질립,재대장애희균중진행표체.방법 용RT-PCR적방법종만성을간환자외주혈림파세포총RNA중역전록득도PD-1기인적cDNA,구건PD-1기인적원핵표체질립,재대장애희균BL21(DE3)중진행표체병순화.용SDS-PAGE、DNA측서、안기산측서등방법대표체단백진행감정.결과 극륭도PD-1기인편마구전장서렬cDNA,경DNA측서여이보도적서렬동원성체99.8%.구건득도PD-1적원핵표체질립,병재대장애희균중표체,순화획득순도교고적PD-1단백.안기산측서증명표체단백적정학성.결론 성공극륭인PD-1기인,재대장애희균중획득표체,득도순화적PD-1단백,위진일보연구PD-1단백적공능급응용타하기출.
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