CAJ | 학술논문

目的观察热损伤后成纤维细胞凋亡模型中,外用成纤维细胞生长因子2(FGF2)对凋亡细胞S100蛋白表达的影响.方法用含体积分数5%小牛血清的DMEM溶液培养已大致融合的成纤维细胞24 h,置入45℃恒温水浴锅中孵育10 min,建立热损伤细胞模型(热损伤组,3瓶),在上述基础上立即加入FGF2(FGF2组,10μg/L,3瓶).两组细胞继续常规培养30 min后作免疫荧光双标记,利用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)和增殖细胞核抗原(PCNA)以及S100蛋白、磷酸酪氨酸蛋白(P-tyr)、src基因产物蛋白同源的酪氨酸激酶催化功能区-2(SH2-P)表达的变化.结果热损伤组细胞可以同时表达caspase-3蛋白和PCNA两种抗体,其灰度值分别为140±31、52±8;FGF2组细胞亦见上述两种抗体表达,灰度值分别为75±28、131±17,PCNA表达量与热损伤组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).同时,热损伤组成纤维细胞S100、P-tyr蛋白、SH2-P蛋白表达阳性,FGF2组细胞S100蛋白和SH2-P的表达明显较弱(P＜0.05)、P-tyr的表达略有减弱.结论离体情况下,热损伤可诱导成纤维细胞凋亡信号的表达;S100蛋白在FGF2对热损伤导致的凋亡成纤维细胞的增殖和抗凋亡作用中扮演重要角色.
목적관찰열손상후성섬유세포조망모형중,외용성섬유세포생장인자2(FGF2)대조망세포S100단백표체적영향.방법용함체적분수5%소우혈청적DMEM용액배양이대치융합적성섬유세포24 h,치입45℃항온수욕과중부육10 min,건립열손상세포모형(열손상조,3병),재상술기출상립즉가입FGF2(FGF2조,10μg/L,3병).량조세포계속상규배양30 min후작면역형광쌍표기,이용격광소묘공취초현미경관찰세포반광안산천동안산단백매3(caspase-3)화증식세포핵항원(PCNA)이급S100단백、린산락안산단백(P-tyr)、src기인산물단백동원적락안산격매최화공능구-2(SH2-P)표체적변화.결과열손상조세포가이동시표체caspase-3단백화PCNA량충항체,기회도치분별위140±31、52±8;FGF2조세포역견상술량충항체표체,회도치분별위75±28、131±17,PCNA표체량여열손상조비교,차이유통계학의의(P＜0.05).동시,열손상조성섬유세포S100、P-tyr단백、SH2-P단백표체양성,FGF2조세포S100단백화SH2-P적표체명현교약(P＜0.05)、P-tyr적표체략유감약.결론리체정황하,열손상가유도성섬유세포조망신호적표체;S100단백재FGF2대열손상도치적조망성섬유세포적증식화항조망작용중분연중요각색.