CAJ | 학술논문

为研究禽流感病毒(AIV)H5亚型同义Consensus HA (Cons-HA5)基因的重组表达质粒在体外的表达情况,本研究通过对从NCBI流感数据库中获得的5000条H5亚型AIV的HA蛋白的序列比对、分析获得一条同义HA蛋白,将其相对应的核苷酸序列进行鸡体偏嗜性密码子优化,人工合成Cons-HA5基因并克隆于真核表达载体pCAGGS中构建重组表达质粒pCACons-HA5.将重组质粒转染293-T细胞,在激光共聚焦显微镜下观察转染后不同时间HA蛋白的表达情况,同时在转染后24 h、48 h后分别进行表达蛋白的western blot检测.结果表明,pCACons-HA5转染293-T细胞后,其表达的HA蛋白先分布于细胞质中,而后转移至细胞膜表面；Western blot鉴定结果表明,Cons-HA5重组蛋白可以与AIV多克隆血清反应分子量约为70 ku.该重组质粒的构建将为进一步Cons-HA5核酸免疫对H5亚型不同抗原群AIV的交叉保护免疫效力研究奠定基础.
위연구금류감병독(AIV)H5아형동의Consensus HA (Cons-HA5)기인적중조표체질립재체외적표체정황,본연구통과대종NCBI류감수거고중획득적5000조H5아형AIV적HA단백적서렬비대、분석획득일조동의HA단백,장기상대응적핵감산서렬진행계체편기성밀마자우화,인공합성Cons-HA5기인병극륭우진핵표체재체pCAGGS중구건중조표체질립pCACons-HA5.장중조질립전염293-T세포,재격광공취초현미경하관찰전염후불동시간HA단백적표체정황,동시재전염후24 h、48 h후분별진행표체단백적western blot검측.결과표명,pCACons-HA5전염293-T세포후,기표체적HA단백선분포우세포질중,이후전이지세포막표면；Western blot감정결과표명,Cons-HA5중조단백가이여AIV다극륭혈청반응분자량약위70 ku.해중조질립적구건장위진일보Cons-HA5핵산면역대H5아형불동항원군AIV적교차보호면역효력연구전정기출.