分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2012年
7期
1037-1042
,共6页
刘云龙%陈之遥%武海萍%周国华
劉雲龍%陳之遙%武海萍%週國華
류운룡%진지요%무해평%주국화
亚甲基四氢叶酸还原酶基因%基因分型%全血直接扩增%焦磷酸测序
亞甲基四氫葉痠還原酶基因%基因分型%全血直接擴增%焦燐痠測序
아갑기사경협산환원매기인%기인분형%전혈직접확증%초린산측서
亚甲基四氢叶酸还原酶基因677C＞T和1298A＞C两个位点的多态性与临床常用抗肿瘤药物甲氨喋呤及氟尿嘧啶的作用密切相关,对这两个位点多态性的检测能指导临床合理用药.为进一步缩短检测时间,降低检测成本,本研究建立了基于全血直接PCR的焦测序检测方法,采用“HpH Buffer”直接扩增全血模板,仅需1 μL全血样本即可对两个位点进行高效扩增.扩增产物经碱变性法制备单链模板后进行焦磷酸测序,经过条件优化,仅需5μL扩增产物和1 μL微球即可完成高灵敏的焦测序反应.为验证方法的准确性,检测了12例临床样本,均能正确检测两个位点的基因多态性.本研究为临床基因多态性检测提供了一种操作简便,耗时短,成本低,准确度高的方法,本方法可用于指导甲氨喋呤和5-氟尿嘧啶的个体化用药.
亞甲基四氫葉痠還原酶基因677C＞T和1298A＞C兩箇位點的多態性與臨床常用抗腫瘤藥物甲氨喋呤及氟尿嘧啶的作用密切相關,對這兩箇位點多態性的檢測能指導臨床閤理用藥.為進一步縮短檢測時間,降低檢測成本,本研究建立瞭基于全血直接PCR的焦測序檢測方法,採用“HpH Buffer”直接擴增全血模闆,僅需1 μL全血樣本即可對兩箇位點進行高效擴增.擴增產物經堿變性法製備單鏈模闆後進行焦燐痠測序,經過條件優化,僅需5μL擴增產物和1 μL微毬即可完成高靈敏的焦測序反應.為驗證方法的準確性,檢測瞭12例臨床樣本,均能正確檢測兩箇位點的基因多態性.本研究為臨床基因多態性檢測提供瞭一種操作簡便,耗時短,成本低,準確度高的方法,本方法可用于指導甲氨喋呤和5-氟尿嘧啶的箇體化用藥.
아갑기사경협산환원매기인677C＞T화1298A＞C량개위점적다태성여림상상용항종류약물갑안첩령급불뇨밀정적작용밀절상관,대저량개위점다태성적검측능지도림상합리용약.위진일보축단검측시간,강저검측성본,본연구건립료기우전혈직접PCR적초측서검측방법,채용“HpH Buffer”직접확증전혈모판,부수1 μL전혈양본즉가대량개위점진행고효확증.확증산물경감변성법제비단련모판후진행초린산측서,경과조건우화,부수5μL확증산물화1 μL미구즉가완성고령민적초측서반응.위험증방법적준학성,검측료12례림상양본,균능정학검측량개위점적기인다태성.본연구위림상기인다태성검측제공료일충조작간편,모시단,성본저,준학도고적방법,본방법가용우지도갑안첩령화5-불뇨밀정적개체화용약.
