中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
CHINA ANMAL QUARANTINE
2009年
3期
31-34
,共4页
吴美芹%杨宾宾%孙强强%单虎%李明义
吳美芹%楊賓賓%孫彊彊%單虎%李明義
오미근%양빈빈%손강강%단호%리명의
禽流感病毒%禽痘病毒%HA基因%重组禽痘病毒
禽流感病毒%禽痘病毒%HA基因%重組禽痘病毒
금류감병독%금두병독%HA기인%중조금두병독
本试验构建了H9亚型禽流感病毒HA基因禽痘病毒转移载体,经转染、蓝斑克隆、筛选和纯化,获得了遗传性状稳定的HA基因重组禽痘病毒.提取感染重组病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)的DNA进行PCR扩增,获得1.7kb的携带有外源目的基因片段.收集纯化的重组病毒CEF细胞,用H9亚型禽流感病毒多克隆血清作一抗,碱性磷酸酶标记的鸡IgG为二抗进行Western blot检测,结果表明重组痘病毒能在体外的CEF细胞表达HA糖蛋白.
本試驗構建瞭H9亞型禽流感病毒HA基因禽痘病毒轉移載體,經轉染、藍斑剋隆、篩選和純化,穫得瞭遺傳性狀穩定的HA基因重組禽痘病毒.提取感染重組病毒的鷄胚成纖維細胞(CEF)的DNA進行PCR擴增,穫得1.7kb的攜帶有外源目的基因片段.收集純化的重組病毒CEF細胞,用H9亞型禽流感病毒多剋隆血清作一抗,堿性燐痠酶標記的鷄IgG為二抗進行Western blot檢測,結果錶明重組痘病毒能在體外的CEF細胞錶達HA糖蛋白.
본시험구건료H9아형금류감병독HA기인금두병독전이재체,경전염、람반극륭、사선화순화,획득료유전성상은정적HA기인중조금두병독.제취감염중조병독적계배성섬유세포(CEF)적DNA진행PCR확증,획득1.7kb적휴대유외원목적기인편단.수집순화적중조병독CEF세포,용H9아형금류감병독다극륭혈청작일항,감성린산매표기적계IgG위이항진행Western blot검측,결과표명중조두병독능재체외적CEF세포표체HA당단백.