浙江农业学报
浙江農業學報
절강농업학보
ACTA AGRICULTURAE ZHEJIANGENSIS
2009年
2期
85-90
,共6页
姜永厚%商晗武%徐辉%陈伟杰%丁先锋%赵灵燕
薑永厚%商晗武%徐輝%陳偉傑%丁先鋒%趙靈燕
강영후%상함무%서휘%진위걸%정선봉%조령연
猪瘟病毒%基因芯片%寡聚核苷酸探针%检测
豬瘟病毒%基因芯片%寡聚覈苷痠探針%檢測
저온병독%기인심편%과취핵감산탐침%검측
应用寡聚核苷酸基因杂交技术建立一种快速可靠的检测猪瘟病毒的方法.在CSFV病毒保守序列5′非编码区设计了两对特异性引物,在此引物之间设计了特异的核苷酸探针(22～30 mer).通过PCR扩增Cy5标记的DNA片段与固定在玻片表面的探针杂交进行CSFV检测.该技术结合了PCR方法的高度敏感性和DNA-DNA杂交技术的选择特异性.并利用该方法对87例临床样品进行了检测鉴定,结果分析显示,可准确鉴别CSFV病毒,灵敏度与琼脂糖凝胶检测接近,可检测到的质粒最低浓度为0.4 pg/μl.结果表明寡核苷酸基因芯片技术可有效地应用于CSFV临床诊断和分子流行病学调查.
應用寡聚覈苷痠基因雜交技術建立一種快速可靠的檢測豬瘟病毒的方法.在CSFV病毒保守序列5′非編碼區設計瞭兩對特異性引物,在此引物之間設計瞭特異的覈苷痠探針(22～30 mer).通過PCR擴增Cy5標記的DNA片段與固定在玻片錶麵的探針雜交進行CSFV檢測.該技術結閤瞭PCR方法的高度敏感性和DNA-DNA雜交技術的選擇特異性.併利用該方法對87例臨床樣品進行瞭檢測鑒定,結果分析顯示,可準確鑒彆CSFV病毒,靈敏度與瓊脂糖凝膠檢測接近,可檢測到的質粒最低濃度為0.4 pg/μl.結果錶明寡覈苷痠基因芯片技術可有效地應用于CSFV臨床診斷和分子流行病學調查.
응용과취핵감산기인잡교기술건립일충쾌속가고적검측저온병독적방법.재CSFV병독보수서렬5′비편마구설계료량대특이성인물,재차인물지간설계료특이적핵감산탐침(22～30 mer).통과PCR확증Cy5표기적DNA편단여고정재파편표면적탐침잡교진행CSFV검측.해기술결합료PCR방법적고도민감성화DNA-DNA잡교기술적선택특이성.병이용해방법대87례림상양품진행료검측감정,결과분석현시,가준학감별CSFV병독,령민도여경지당응효검측접근,가검측도적질립최저농도위0.4 pg/μl.결과표명과핵감산기인심편기술가유효지응용우CSFV림상진단화분자류행병학조사.
