CAJ | 학술논문

目的探讨1-磷酸鞘氨醇受体(S1PRs)在CD34+造血干/祖细胞迁移中的作用.方法用密度梯度离心法分离脐血 CD34+细胞,悬浮于transwell培养板的上层,在不同组细胞中分别给予FTY720预处理、含或不含百日咳毒素(PTX)或CXCR4单抗,下层添加SDF-1,流式细胞仪检测迁移细胞数,计算迁移率.同时用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测迁移前后CD34+细胞的SlPRs的表达情况.另用兀Y720处理脐血CD34+细胞,在不同时间点(1、8、16h)用流式细胞仪检测CD49d(VLA-4)、CD11a(LFA-1)、CD62L(L-selectin)的表达.结果 FTY720不影响CD34+细胞的自发迁移,但明显促进SDF-1诱导的CD34+细胞迁移(15.262.14 vs 28.64 2.37),这种作用可以被PTX和CXCR4单抗完全阻断.新鲜分离的脐血CD34+细胞表达S1P1-5,但在FTY720和SDF-1作用下发生迁移的CD34+细胞只表达S1P1、S1P3,S1P4.CD34+细胞在FTY720作用下各个时间点测得的黏附分子表达水平无差别.结论 S1PRs可能与CD34+细胞快速迁移有关,激活S1PRs能够增加SDF-1对CD34+细胞的趋化作用,这种作用是通过CXCR4介导的,信号传递偶联PTX敏感的Gi蛋白受体家族.表达特定S1PRs的CD34+细胞才容易发生快速迁移.FTY720不改变CD34+细胞黏附分子的表达.
목적 탐토1-린산초안순수체(S1PRs)재CD34+조혈간/조세포천이중적작용.방법 용밀도제도리심법분리제혈 CD34+세포,현부우transwell배양판적상층,재불동조세포중분별급여FTY720예처리、함혹불함백일해독소(PTX)혹CXCR4단항,하층첨가SDF-1,류식세포의검측천이세포수,계산천이솔.동시용역전록-취합매련반응(RT-PCR)적방법검측천이전후CD34+세포적SlPRs적표체정황.령용올Y720처리제혈CD34+세포,재불동시간점(1、8、16h)용류식세포의검측CD49d(VLA-4)、CD11a(LFA-1)、CD62L(L-selectin)적표체.결과 FTY720불영향CD34+세포적자발천이,단명현촉진SDF-1유도적CD34+세포천이(15.262.14 vs 28.64 2.37),저충작용가이피PTX화CXCR4단항완전조단.신선분리적제혈CD34+세포표체S1P1-5,단재FTY720화SDF-1작용하발생천이적CD34+세포지표체S1P1、S1P3,S1P4.CD34+세포재FTY720작용하각개시간점측득적점부분자표체수평무차별.결론 S1PRs가능여CD34+세포쾌속천이유관,격활S1PRs능구증가SDF-1대CD34+세포적추화작용,저충작용시통과CXCR4개도적,신호전체우련PTX민감적Gi단백수체가족.표체특정S1PRs적CD34+세포재용역발생쾌속천이.FTY720불개변CD34+세포점부분자적표체.