中西医结合学报
中西醫結閤學報
중서의결합학보
JOURNAL OF CHINESE INTEGRATIVE MDEICINE
2011年
2期
165-172
,共8页
骨质疏松,绝经后%大豆素%受体,雌激素%过氧化物酶体增殖物激活受体
骨質疏鬆,絕經後%大豆素%受體,雌激素%過氧化物酶體增殖物激活受體
골질소송,절경후%대두소%수체,자격소%과양화물매체증식물격활수체
目的:研究不同剂量大豆苷原(daidzein,DAI)对成骨细胞骨形成的作用及雌激素受体(estrogen receptor,ER)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)对DAI促进骨形成的调节作用.方法:以培养的未经处理的人类胎儿成骨细胞(human fetal osteoblast,hFOB)为对照组,用17β-戊酸雌二醇(β-estradiol-17-valerate,E2)和不同浓度DAI分别处理hFOB 72 h后,噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞增殖情况,4-硝基苯基磷酸二钠盐(4-nitrophenyl phosphate disodium salt,PNPP)偶氮法测定成骨细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性.用ER拮抗剂ICI 182780、ERα拮抗剂MPP(methyl-piperidino-pyrazole)、PPARγ拮抗剂GW 9662分别阻断受体ER、ERa和PPARγ后,再给予E2及不同浓度的DAI处理,MTT法检测成骨细胞增殖情况并计算细胞增殖率,PNPP偶氮法测定ALP水平.结果:随着DAI剂量的增加,成骨细胞增殖率递减,DAI 10-9 mol/L组较对照组显著升高,DAI 10-5 mol/L组较对照组显著降低(P＜0.05).随着DAI剂量的增加,成骨细胞ALP水平递减,但差异无统计学意义(P＞0.05).ICI 182780阻滞ER后,E2组,DAI 10-8、10-7及10-5 mol/L组的细胞增殖率分别为88.16%、76.30%、81.18%、83.19%,均显著低于阻滞前(P＜0.05);MPP单纯阻滞ERα后,E2组,DAI 10-9、10-7及10-5 mol/L组的细胞增殖率分别为69.78%、63.31%、70.71%、78.43%,均显著低于阻滞前(P＜0.05).MPP阻滞后,DAI10-9 mol/L组的ALP水平显著低于阻滞前(P＜0.05).GW9662阻滞PPARγ后,E2组,DAI10-9、10-7及10-5 mol/L组的细胞增殖率分别为103.14%、96.99%、112.88%和122.22%,其中DAI 10-7及10-5 mol/L组均较阻滞前显著升高(P＜0.05),DAI 10-9 mol/L组轻度降低但差异无统计学意义.DAI 10-5 mol/L组的ALP水平较阻滞前显著升高(P＜0.05).结论:DAI的骨保护作用具有剂量依赖性的双相作用特点,即低剂量DAI促进成骨细胞增殖,高剂量DAI抑制成骨细胞增殖.低剂量DAI主要通过作用于ER促进成骨细胞增殖和分化,对PPARγ的作用不明显;高剂量DAI主要通过作用于PPARγ抑制成骨细胞增殖和分化,同时也可通过作用于ER产生一定促进成骨细胞增殖的作用.
目的:研究不同劑量大豆苷原(daidzein,DAI)對成骨細胞骨形成的作用及雌激素受體(estrogen receptor,ER)和過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)對DAI促進骨形成的調節作用.方法:以培養的未經處理的人類胎兒成骨細胞(human fetal osteoblast,hFOB)為對照組,用17β-戊痠雌二醇(β-estradiol-17-valerate,E2)和不同濃度DAI分彆處理hFOB 72 h後,噻唑藍(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法測定細胞增殖情況,4-硝基苯基燐痠二鈉鹽(4-nitrophenyl phosphate disodium salt,PNPP)偶氮法測定成骨細胞堿性燐痠酶(alkaline phosphatase,ALP)活性.用ER拮抗劑ICI 182780、ERα拮抗劑MPP(methyl-piperidino-pyrazole)、PPARγ拮抗劑GW 9662分彆阻斷受體ER、ERa和PPARγ後,再給予E2及不同濃度的DAI處理,MTT法檢測成骨細胞增殖情況併計算細胞增殖率,PNPP偶氮法測定ALP水平.結果:隨著DAI劑量的增加,成骨細胞增殖率遞減,DAI 10-9 mol/L組較對照組顯著升高,DAI 10-5 mol/L組較對照組顯著降低(P＜0.05).隨著DAI劑量的增加,成骨細胞ALP水平遞減,但差異無統計學意義(P＞0.05).ICI 182780阻滯ER後,E2組,DAI 10-8、10-7及10-5 mol/L組的細胞增殖率分彆為88.16%、76.30%、81.18%、83.19%,均顯著低于阻滯前(P＜0.05);MPP單純阻滯ERα後,E2組,DAI 10-9、10-7及10-5 mol/L組的細胞增殖率分彆為69.78%、63.31%、70.71%、78.43%,均顯著低于阻滯前(P＜0.05).MPP阻滯後,DAI10-9 mol/L組的ALP水平顯著低于阻滯前(P＜0.05).GW9662阻滯PPARγ後,E2組,DAI10-9、10-7及10-5 mol/L組的細胞增殖率分彆為103.14%、96.99%、112.88%和122.22%,其中DAI 10-7及10-5 mol/L組均較阻滯前顯著升高(P＜0.05),DAI 10-9 mol/L組輕度降低但差異無統計學意義.DAI 10-5 mol/L組的ALP水平較阻滯前顯著升高(P＜0.05).結論:DAI的骨保護作用具有劑量依賴性的雙相作用特點,即低劑量DAI促進成骨細胞增殖,高劑量DAI抑製成骨細胞增殖.低劑量DAI主要通過作用于ER促進成骨細胞增殖和分化,對PPARγ的作用不明顯;高劑量DAI主要通過作用于PPARγ抑製成骨細胞增殖和分化,同時也可通過作用于ER產生一定促進成骨細胞增殖的作用.
목적:연구불동제량대두감원(daidzein,DAI)대성골세포골형성적작용급자격소수체(estrogen receptor,ER)화과양화물매체증식물격활수체γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)대DAI촉진골형성적조절작용.방법:이배양적미경처리적인류태인성골세포(human fetal osteoblast,hFOB)위대조조,용17β-무산자이순(β-estradiol-17-valerate,E2)화불동농도DAI분별처리hFOB 72 h후,새서람(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)법측정세포증식정황,4-초기분기린산이납염(4-nitrophenyl phosphate disodium salt,PNPP)우담법측정성골세포감성린산매(alkaline phosphatase,ALP)활성.용ER길항제ICI 182780、ERα길항제MPP(methyl-piperidino-pyrazole)、PPARγ길항제GW 9662분별조단수체ER、ERa화PPARγ후,재급여E2급불동농도적DAI처리,MTT법검측성골세포증식정황병계산세포증식솔,PNPP우담법측정ALP수평.결과:수착DAI제량적증가,성골세포증식솔체감,DAI 10-9 mol/L조교대조조현저승고,DAI 10-5 mol/L조교대조조현저강저(P＜0.05).수착DAI제량적증가,성골세포ALP수평체감,단차이무통계학의의(P＞0.05).ICI 182780조체ER후,E2조,DAI 10-8、10-7급10-5 mol/L조적세포증식솔분별위88.16%、76.30%、81.18%、83.19%,균현저저우조체전(P＜0.05);MPP단순조체ERα후,E2조,DAI 10-9、10-7급10-5 mol/L조적세포증식솔분별위69.78%、63.31%、70.71%、78.43%,균현저저우조체전(P＜0.05).MPP조체후,DAI10-9 mol/L조적ALP수평현저저우조체전(P＜0.05).GW9662조체PPARγ후,E2조,DAI10-9、10-7급10-5 mol/L조적세포증식솔분별위103.14%、96.99%、112.88%화122.22%,기중DAI 10-7급10-5 mol/L조균교조체전현저승고(P＜0.05),DAI 10-9 mol/L조경도강저단차이무통계학의의.DAI 10-5 mol/L조적ALP수평교조체전현저승고(P＜0.05).결론:DAI적골보호작용구유제량의뢰성적쌍상작용특점,즉저제량DAI촉진성골세포증식,고제량DAI억제성골세포증식.저제량DAI주요통과작용우ER촉진성골세포증식화분화,대PPARγ적작용불명현;고제량DAI주요통과작용우PPARγ억제성골세포증식화분화,동시야가통과작용우ER산생일정촉진성골세포증식적작용.
