动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2010年
6期
58-61
,共4页
姜德玉%刘坤%赵晓燕%张伟%李君丽%王希良%于三科
薑德玉%劉坤%趙曉燕%張偉%李君麗%王希良%于三科
강덕옥%류곤%조효연%장위%리군려%왕희량%우삼과
Ⅱ型单纯疱疹病毒%糖蛋白D%Bac-to-bac表达系统
Ⅱ型單純皰疹病毒%糖蛋白D%Bac-to-bac錶達繫統
Ⅱ형단순포진병독%당단백D%Bac-to-bac표체계통
以Ⅱ亚单纯疱疹毒-2333株(HSV-2)的基因组DNA为模板扩增编码HSV-2糖蛋白D(glyco-protein D)基因,与载体pFastBac Ⅰ连接,转化E.coil DH5α感受态细胞,经PCR及测序鉴定正确.将pFastBac Ⅰ-gD重组质粒转座至DH10Bac获得重组穿梭质粒,转染Sf9昆虫细胞,荻得重组杆状病毒.重组杆状病毒感染Sf9细胞表达重组蛋白,经对表达条件进行优化,SDS-PAGE和Western blot鏊定,成功表达HSV-2 gD蛋白,为下一步的工作奠定了基础.
以Ⅱ亞單純皰疹毒-2333株(HSV-2)的基因組DNA為模闆擴增編碼HSV-2糖蛋白D(glyco-protein D)基因,與載體pFastBac Ⅰ連接,轉化E.coil DH5α感受態細胞,經PCR及測序鑒定正確.將pFastBac Ⅰ-gD重組質粒轉座至DH10Bac穫得重組穿梭質粒,轉染Sf9昆蟲細胞,荻得重組桿狀病毒.重組桿狀病毒感染Sf9細胞錶達重組蛋白,經對錶達條件進行優化,SDS-PAGE和Western blot鏊定,成功錶達HSV-2 gD蛋白,為下一步的工作奠定瞭基礎.
이Ⅱ아단순포진독-2333주(HSV-2)적기인조DNA위모판확증편마HSV-2당단백D(glyco-protein D)기인,여재체pFastBac Ⅰ련접,전화E.coil DH5α감수태세포,경PCR급측서감정정학.장pFastBac Ⅰ-gD중조질립전좌지DH10Bac획득중조천사질립,전염Sf9곤충세포,적득중조간상병독.중조간상병독감염Sf9세포표체중조단백,경대표체조건진행우화,SDS-PAGE화Western blot오정,성공표체HSV-2 gD단백,위하일보적공작전정료기출.
