中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2008年
11期
1513-1517
,共5页
高琳琳%李福荣%康莉%司艳红%王浩%胡维诚
高琳琳%李福榮%康莉%司豔紅%王浩%鬍維誠
고림림%리복영%강리%사염홍%왕호%호유성
内皮细胞%蚤休醇提物%氧化%损伤%细胞周期%凋亡%caspase-3
內皮細胞%蚤休醇提物%氧化%損傷%細胞週期%凋亡%caspase-3
내피세포%조휴순제물%양화%손상%세포주기%조망%caspase-3
目的 制备中药蚤休醇提物,研究其对H2O2诱导的脐静脉内皮细胞(ECV304细胞)损伤的保护作用及其机制.方法 体外培养ECV304细胞,建立氧化损伤的细胞模型,然后分为五个实验处理组:①正常对照组;②氧化损伤组;③高浓度蚤休醇提物(EFB 500 ng·L-1)组;④中浓度蚤休醇提物(50 ng·L-1)组,⑤低浓度(5 ng·L-1)组.应用流式细胞仪Annexin V/PI染色检测该药物干预H2O2氧化损伤前后的细胞凋亡、PI染色检测细胞周期与凋亡的关系;RT-PCR检测各实验组caspase-3 mRNA表达的变化.结果 采用流式细胞仪PI染色检测结果 对细胞周期进行分析,表明损伤作用于ECV-304细胞后,细胞在G0/G1期的数目增多,在S期的数目减少,同时流式细胞仪检测可见亚二倍体峰,而蚤休醇提物预处理以后,S期细胞数明显增多.流式细胞仪Annexin V/PI检测方法 显示,损伤组的早期与晚期凋亡率之和最高,预处理后细胞的早期与晚期凋亡率之和降低.caspase-3 mRNA水平在各实验组的表达显示损伤组与内参照相比的灰度值最大,经过预处理之后其值明显下降(P<0.01).结论 蚤休醇提物可以保护H2O2造成的ECV304细胞的氧化损伤,是通过保护细胞周期正常进行、抑制凋亡蛋白caspase-3介导的凋亡信号转导通路实现的.
目的 製備中藥蚤休醇提物,研究其對H2O2誘導的臍靜脈內皮細胞(ECV304細胞)損傷的保護作用及其機製.方法 體外培養ECV304細胞,建立氧化損傷的細胞模型,然後分為五箇實驗處理組:①正常對照組;②氧化損傷組;③高濃度蚤休醇提物(EFB 500 ng·L-1)組;④中濃度蚤休醇提物(50 ng·L-1)組,⑤低濃度(5 ng·L-1)組.應用流式細胞儀Annexin V/PI染色檢測該藥物榦預H2O2氧化損傷前後的細胞凋亡、PI染色檢測細胞週期與凋亡的關繫;RT-PCR檢測各實驗組caspase-3 mRNA錶達的變化.結果 採用流式細胞儀PI染色檢測結果 對細胞週期進行分析,錶明損傷作用于ECV-304細胞後,細胞在G0/G1期的數目增多,在S期的數目減少,同時流式細胞儀檢測可見亞二倍體峰,而蚤休醇提物預處理以後,S期細胞數明顯增多.流式細胞儀Annexin V/PI檢測方法 顯示,損傷組的早期與晚期凋亡率之和最高,預處理後細胞的早期與晚期凋亡率之和降低.caspase-3 mRNA水平在各實驗組的錶達顯示損傷組與內參照相比的灰度值最大,經過預處理之後其值明顯下降(P<0.01).結論 蚤休醇提物可以保護H2O2造成的ECV304細胞的氧化損傷,是通過保護細胞週期正常進行、抑製凋亡蛋白caspase-3介導的凋亡信號轉導通路實現的.
목적 제비중약조휴순제물,연구기대H2O2유도적제정맥내피세포(ECV304세포)손상적보호작용급기궤제.방법 체외배양ECV304세포,건립양화손상적세포모형,연후분위오개실험처리조:①정상대조조;②양화손상조;③고농도조휴순제물(EFB 500 ng·L-1)조;④중농도조휴순제물(50 ng·L-1)조,⑤저농도(5 ng·L-1)조.응용류식세포의Annexin V/PI염색검측해약물간예H2O2양화손상전후적세포조망、PI염색검측세포주기여조망적관계;RT-PCR검측각실험조caspase-3 mRNA표체적변화.결과 채용류식세포의PI염색검측결과 대세포주기진행분석,표명손상작용우ECV-304세포후,세포재G0/G1기적수목증다,재S기적수목감소,동시류식세포의검측가견아이배체봉,이조휴순제물예처리이후,S기세포수명현증다.류식세포의Annexin V/PI검측방법 현시,손상조적조기여만기조망솔지화최고,예처리후세포적조기여만기조망솔지화강저.caspase-3 mRNA수평재각실험조적표체현시손상조여내삼조상비적회도치최대,경과예처리지후기치명현하강(P<0.01).결론 조휴순제물가이보호H2O2조성적ECV304세포적양화손상,시통과보호세포주기정상진행、억제조망단백caspase-3개도적조망신호전도통로실현적.
