细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
11期
1106-1109
,共4页
戴宝贞%周亮%付玉龙%丁镇伟%李煜%吴冠青
戴寶貞%週亮%付玉龍%丁鎮偉%李煜%吳冠青
대보정%주량%부옥룡%정진위%리욱%오관청
小鼠双尾-C基因%Bicc1%多克隆抗体%多囊肾
小鼠雙尾-C基因%Bicc1%多剋隆抗體%多囊腎
소서쌍미-C기인%Bicc1%다극륭항체%다낭신
目的:制备小鼠双尾C蛋白Bicc1的多克隆抗体并确定其在细胞内定位.方法:根据生物信息学分析结果, PCR扩增小鼠Bicc1编码61E-199A的cDNA片段.将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上, 在IPTG诱导下产生Bicc1-N抗原.纯化目的蛋白并制备兔抗Bicc1蛋白多克隆抗体.Western blot鉴定抗体特异性, 并以间接免疫荧光法初步分析该蛋白在细胞内定位.结果:成功构建Bicc1-N片段原核表达载体, 在大肠杆菌中实现可溶性表达, 制备小鼠Bicc1蛋白的多克隆抗体, 并证实该蛋白主要表达于细胞质内.结论:成功制备了高效价并特异的兔抗Bicc1多克隆抗体, 为进一步研究Bicc1基因产物的生物功能奠定了基础.
目的:製備小鼠雙尾C蛋白Bicc1的多剋隆抗體併確定其在細胞內定位.方法:根據生物信息學分析結果, PCR擴增小鼠Bicc1編碼61E-199A的cDNA片段.將該片段剋隆到GST融閤蛋白錶達載體上, 在IPTG誘導下產生Bicc1-N抗原.純化目的蛋白併製備兔抗Bicc1蛋白多剋隆抗體.Western blot鑒定抗體特異性, 併以間接免疫熒光法初步分析該蛋白在細胞內定位.結果:成功構建Bicc1-N片段原覈錶達載體, 在大腸桿菌中實現可溶性錶達, 製備小鼠Bicc1蛋白的多剋隆抗體, 併證實該蛋白主要錶達于細胞質內.結論:成功製備瞭高效價併特異的兔抗Bicc1多剋隆抗體, 為進一步研究Bicc1基因產物的生物功能奠定瞭基礎.
목적:제비소서쌍미C단백Bicc1적다극륭항체병학정기재세포내정위.방법:근거생물신식학분석결과, PCR확증소서Bicc1편마61E-199A적cDNA편단.장해편단극륭도GST융합단백표체재체상, 재IPTG유도하산생Bicc1-N항원.순화목적단백병제비토항Bicc1단백다극륭항체.Western blot감정항체특이성, 병이간접면역형광법초보분석해단백재세포내정위.결과:성공구건Bicc1-N편단원핵표체재체, 재대장간균중실현가용성표체, 제비소서Bicc1단백적다극륭항체, 병증실해단백주요표체우세포질내.결론:성공제비료고효개병특이적토항Bicc1다극륭항체, 위진일보연구Bicc1기인산물적생물공능전정료기출.
