云南农业大学学报
雲南農業大學學報
운남농업대학학보
JOURNAL OF YUNNAN AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
1期
68-72
,共5页
李莲瑞%卢强%刘明远%崔国祯%韩文瑜
李蓮瑞%盧彊%劉明遠%崔國禎%韓文瑜
리련서%로강%류명원%최국정%한문유
鲤鱼%IL8%克隆%序列分析
鯉魚%IL8%剋隆%序列分析
리어%IL8%극륭%서렬분석
利用DD-RTPCR(正常鲤鱼外周血白细胞和经有丝分裂源刺激后白细胞的总RNA)获得的差异显示片段B10克隆(编码IL8的一段序列),对该基因进行DIG标记,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从0.8×104个重组噬菌体中,经过2轮筛选最终获得阳性克隆,挑选了3个分别命名为IL8-1,IL8-2,IL8-3.测序后经NCBI Blast分析表明,阳性克隆具有完整阅读框架,均为编码鲤鱼IL8的全长cDNA,编码的多肽由98个氨基酸残基组成,其相对分子质量理论推导值为10 848.9 Da,等电点为8.68.且与2003年12月Dev Comp Immunol.杂志报道的荷兰鲤鱼氨基酸的同源性达84%.
利用DD-RTPCR(正常鯉魚外週血白細胞和經有絲分裂源刺激後白細胞的總RNA)穫得的差異顯示片段B10剋隆(編碼IL8的一段序列),對該基因進行DIG標記,對有絲分裂原刺激的鯉魚外週血白細胞cDNA文庫進行覈痠雜交篩選,從0.8×104箇重組噬菌體中,經過2輪篩選最終穫得暘性剋隆,挑選瞭3箇分彆命名為IL8-1,IL8-2,IL8-3.測序後經NCBI Blast分析錶明,暘性剋隆具有完整閱讀框架,均為編碼鯉魚IL8的全長cDNA,編碼的多肽由98箇氨基痠殘基組成,其相對分子質量理論推導值為10 848.9 Da,等電點為8.68.且與2003年12月Dev Comp Immunol.雜誌報道的荷蘭鯉魚氨基痠的同源性達84%.
이용DD-RTPCR(정상리어외주혈백세포화경유사분렬원자격후백세포적총RNA)획득적차이현시편단B10극륭(편마IL8적일단서렬),대해기인진행DIG표기,대유사분렬원자격적리어외주혈백세포cDNA문고진행핵산잡교사선,종0.8×104개중조서균체중,경과2륜사선최종획득양성극륭,도선료3개분별명명위IL8-1,IL8-2,IL8-3.측서후경NCBI Blast분석표명,양성극륭구유완정열독광가,균위편마리어IL8적전장cDNA,편마적다태유98개안기산잔기조성,기상대분자질량이론추도치위10 848.9 Da,등전점위8.68.차여2003년12월Dev Comp Immunol.잡지보도적하란리어안기산적동원성체84%.
