生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2008年
1期
43-46
,共4页
杜建中%孙毅%王景雪%郝曜山%雷海英
杜建中%孫毅%王景雪%郝曜山%雷海英
두건중%손의%왕경설%학요산%뢰해영
矮花叶病%玉米%转基因%RDV运动蛋白缺陷型基因
矮花葉病%玉米%轉基因%RDV運動蛋白缺陷型基因
왜화협병%옥미%전기인%RDV운동단백결함형기인
目的:研究目的基因在转基因植株及其后代中遗传表达的稳定性,以及目的基因表达与抗病性的关系,最终得到转基因纯合株系.方法:以采用花粉介导法将RDV运动蛋白缺陷型(RDV MP-)基因导入玉米自交系478的转基因种子(T0)作为试验材料,对其或其后代进行潮霉素抗性筛选、PCR检测、目的基因表达产物含量测定、农艺性状筛选,以及田间接种病毒的抗病鉴定.结果:通过潮霉素抗性筛选从T0种子获得了11株疑似转化植株;对T1、T2、T3代转基因植株的PCR分析证实目的基因已导入玉米植株,并显示随着转化植株世代交替,目的基因可稳定遗传给下一代,且目的基因在待测材料中的检出比例也随着代数的增加而提高;目的基因表达量的测定结果为1.83~11.57 ng/mg叶片鲜重之间;田间接种玉米矮花叶病病毒试验结果证明转化植株比对照植株的抗矮花叶病能力有了显著提高,个别株系在T1代的发病率就为0,T1、T2、T3代转化植株的抗病性逐代提高,比临近对照的抗病性提高2~5级;目的基因表达量与植株(系)的抗病性显著相关,r=0.923,P<0.01;入选纯合系的农艺性状也有较大变化,穗粒数比对照系增加约5%.结论:通过以上方法,可以筛选到转基因抗病玉米纯合株系.
目的:研究目的基因在轉基因植株及其後代中遺傳錶達的穩定性,以及目的基因錶達與抗病性的關繫,最終得到轉基因純閤株繫.方法:以採用花粉介導法將RDV運動蛋白缺陷型(RDV MP-)基因導入玉米自交繫478的轉基因種子(T0)作為試驗材料,對其或其後代進行潮黴素抗性篩選、PCR檢測、目的基因錶達產物含量測定、農藝性狀篩選,以及田間接種病毒的抗病鑒定.結果:通過潮黴素抗性篩選從T0種子穫得瞭11株疑似轉化植株;對T1、T2、T3代轉基因植株的PCR分析證實目的基因已導入玉米植株,併顯示隨著轉化植株世代交替,目的基因可穩定遺傳給下一代,且目的基因在待測材料中的檢齣比例也隨著代數的增加而提高;目的基因錶達量的測定結果為1.83~11.57 ng/mg葉片鮮重之間;田間接種玉米矮花葉病病毒試驗結果證明轉化植株比對照植株的抗矮花葉病能力有瞭顯著提高,箇彆株繫在T1代的髮病率就為0,T1、T2、T3代轉化植株的抗病性逐代提高,比臨近對照的抗病性提高2~5級;目的基因錶達量與植株(繫)的抗病性顯著相關,r=0.923,P<0.01;入選純閤繫的農藝性狀也有較大變化,穗粒數比對照繫增加約5%.結論:通過以上方法,可以篩選到轉基因抗病玉米純閤株繫.
목적:연구목적기인재전기인식주급기후대중유전표체적은정성,이급목적기인표체여항병성적관계,최종득도전기인순합주계.방법:이채용화분개도법장RDV운동단백결함형(RDV MP-)기인도입옥미자교계478적전기인충자(T0)작위시험재료,대기혹기후대진행조매소항성사선、PCR검측、목적기인표체산물함량측정、농예성상사선,이급전간접충병독적항병감정.결과:통과조매소항성사선종T0충자획득료11주의사전화식주;대T1、T2、T3대전기인식주적PCR분석증실목적기인이도입옥미식주,병현시수착전화식주세대교체,목적기인가은정유전급하일대,차목적기인재대측재료중적검출비례야수착대수적증가이제고;목적기인표체량적측정결과위1.83~11.57 ng/mg협편선중지간;전간접충옥미왜화협병병독시험결과증명전화식주비대조식주적항왜화협병능력유료현저제고,개별주계재T1대적발병솔취위0,T1、T2、T3대전화식주적항병성축대제고,비림근대조적항병성제고2~5급;목적기인표체량여식주(계)적항병성현저상관,r=0.923,P<0.01;입선순합계적농예성상야유교대변화,수립수비대조계증가약5%.결론:통과이상방법,가이사선도전기인항병옥미순합주계.