CAJ | 학술논문

背景与目的:应用基因芯片技术,分析卷烟烟气(cigarette smoke condense,CSC)诱发永生化人支气管上皮细胞BEP2D发生恶性转化不同阶段的基因表达谱变化.材料与方法:用CSC对不同代龄的永生化人支气管上皮细胞BEP2D进行染毒,用软琼脂克隆及流式细胞术对染毒细胞的恶性转化性状进行检测,分离培养已发生恶性转化的软琼脂克隆细胞.分别提取不同代龄染毒细胞的总RNA,选用人类全基因组寡核苷酸芯片Sentrix(R)Human-6 Expression Bead Chip,通过芯片的杂交、清洗及扫描,对染毒细胞的基因表达谱进行分析.结果:用CSC对BEP2D细胞染毒后,从第30代细胞(P30)开始,细胞获得了锚着独立生长特性,流式细胞术分析显示.P40细胞出现多倍体.我们从软琼脂克隆中分离出具有恶性转化特性的细胞C2,与烟气溶剂对照细胞相比,染毒后细胞P10、P20、P30、P40及C2中均表达下调的基因有269个,表达上调的基因有63个,这些基因的改变发生在CSC诱发BEP2D细胞恶性转化的早期阶段.与癌启动相关.CSC染毒后,P10、P20表达没有变化,而在P30、P40及C2中发生表达下调的基因有316个,表达上调的基因有147个,这些基因的改变发生在CSC诱发BEP2D细胞恶性转化的中期,与癌促进相关.结论:从CSC诱发BEP2D细胞恶性转化不同阶段的基因表达谱,筛选出一批与癌症的启动及发展阶段相关的基因,为深入了解吸烟致肺癌的发生、发展机制提供了有价值的信息,同时也为制备吸烟致肺癌相关基因的检测芯片奠定实验基础.
배경여목적:응용기인심편기술,분석권연연기(cigarette smoke condense,CSC)유발영생화인지기관상피세포BEP2D발생악성전화불동계단적기인표체보변화.재료여방법:용CSC대불동대령적영생화인지기관상피세포BEP2D진행염독,용연경지극륭급류식세포술대염독세포적악성전화성상진행검측,분리배양이발생악성전화적연경지극륭세포.분별제취불동대령염독세포적총RNA,선용인류전기인조과핵감산심편Sentrix(R)Human-6 Expression Bead Chip,통과심편적잡교、청세급소묘,대염독세포적기인표체보진행분석.결과:용CSC대BEP2D세포염독후,종제30대세포(P30)개시,세포획득료묘착독립생장특성,류식세포술분석현시.P40세포출현다배체.아문종연경지극륭중분리출구유악성전화특성적세포C2,여연기용제대조세포상비,염독후세포P10、P20、P30、P40급C2중균표체하조적기인유269개,표체상조적기인유63개,저사기인적개변발생재CSC유발BEP2D세포악성전화적조기계단.여암계동상관.CSC염독후,P10、P20표체몰유변화,이재P30、P40급C2중발생표체하조적기인유316개,표체상조적기인유147개,저사기인적개변발생재CSC유발BEP2D세포악성전화적중기,여암촉진상관.결론:종CSC유발BEP2D세포악성전화불동계단적기인표체보,사선출일비여암증적계동급발전계단상관적기인,위심입료해흡연치폐암적발생、발전궤제제공료유개치적신식,동시야위제비흡연치폐암상관기인적검측심편전정실험기출.