时珍国医国药
時珍國醫國藥
시진국의국약
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH
2007年
12期
2892-2894
,共3页
古松%蒋舜媛%唐学芳%孙辉%杨志荣%孙群
古鬆%蔣舜媛%唐學芳%孫輝%楊誌榮%孫群
고송%장순원%당학방%손휘%양지영%손군
羌活%宽叶羌活%简单重复序列区间扩增%正交实验设计
羌活%寬葉羌活%簡單重複序列區間擴增%正交實驗設計
강활%관협강활%간단중복서렬구간확증%정교실험설계
目的 通过探讨羌活和宽叶羌活ISSR实验中各种因素的影响,以建立羌活和宽叶羌活的简单重复序列区间扩增(ISSR-PCR)最佳反应体系.方法 利用正交实验设计L9(34)对羌活和宽叶羌活ISSR-PCR反应体系的4因素(Mg2+,dNTP,引物,Taq酶)在3个水平上进行优化实验,PCR结果用SPSS13.0统计软件分析,并设置梯度PCR进行引物退火温度筛选.结果 在20μl ISSR-PCR反应体系中,各组分的最适浓度为:2.0 mmol/L Mg2+,250μmoL/L dNTPs,0.50 μmol/L引物,1U Taq酶,40 ng DNA模板;模板DNA 40～90 ng,不同引物有不同的最佳退火温度,范围在48～52℃.结论 该优化体系的建立为进一步进行羌活和宽叶羌活种群间遗传多样性研究提供了参考.
目的 通過探討羌活和寬葉羌活ISSR實驗中各種因素的影響,以建立羌活和寬葉羌活的簡單重複序列區間擴增(ISSR-PCR)最佳反應體繫.方法 利用正交實驗設計L9(34)對羌活和寬葉羌活ISSR-PCR反應體繫的4因素(Mg2+,dNTP,引物,Taq酶)在3箇水平上進行優化實驗,PCR結果用SPSS13.0統計軟件分析,併設置梯度PCR進行引物退火溫度篩選.結果 在20μl ISSR-PCR反應體繫中,各組分的最適濃度為:2.0 mmol/L Mg2+,250μmoL/L dNTPs,0.50 μmol/L引物,1U Taq酶,40 ng DNA模闆;模闆DNA 40～90 ng,不同引物有不同的最佳退火溫度,範圍在48～52℃.結論 該優化體繫的建立為進一步進行羌活和寬葉羌活種群間遺傳多樣性研究提供瞭參攷.
목적 통과탐토강활화관협강활ISSR실험중각충인소적영향,이건립강활화관협강활적간단중복서렬구간확증(ISSR-PCR)최가반응체계.방법 이용정교실험설계L9(34)대강활화관협강활ISSR-PCR반응체계적4인소(Mg2+,dNTP,인물,Taq매)재3개수평상진행우화실험,PCR결과용SPSS13.0통계연건분석,병설치제도PCR진행인물퇴화온도사선.결과 재20μl ISSR-PCR반응체계중,각조분적최괄농도위:2.0 mmol/L Mg2+,250μmoL/L dNTPs,0.50 μmol/L인물,1U Taq매,40 ng DNA모판;모판DNA 40～90 ng,불동인물유불동적최가퇴화온도,범위재48～52℃.결론 해우화체계적건립위진일보진행강활화관협강활충군간유전다양성연구제공료삼고.
