吉林大学学报（医学版）
吉林大學學報（醫學版）
길림대학학보（의학판）
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)
2007年
6期
963-967
,共5页
王丁丁%许天敏%余丽江%苏曼曼%黄树林%宿晓云%陈磊%颜炜群
王丁丁%許天敏%餘麗江%囌曼曼%黃樹林%宿曉雲%陳磊%顏煒群
왕정정%허천민%여려강%소만만%황수림%숙효운%진뢰%안위군
人分泌型小分子抗体%毕赤酵母%狂犬病病毒%分泌表达%筛选
人分泌型小分子抗體%畢赤酵母%狂犬病病毒%分泌錶達%篩選
인분비형소분자항체%필적효모%광견병병독%분비표체%사선
目的:利用毕赤酵母人抗狂犬病毒抗体分泌表达文库获得具特异性狂犬病毒抗原结合活性的分泌型小分子抗体(scFv-Fc).方法:RT-PCR方法扩增获得一组轻链和重链可变区基因.利用重叠延伸PCR方法组装scFv基因后克隆入毕赤酵母scFv-Fc抗体库通用表达质粒pPICZα/Fc后,电转化X33酵母菌,甲醇诱导表达后进行ELISA筛选、基因序列分析及免疫印迹分析.结果:构建了抗狂犬病毒毕赤酵母分泌型scFv-Fc库,获得了12株阳性菌株.对其中2株阳性克隆进行了序列分析证实为新的抗体可变区基因.ELISA、Western blotting分析,证实该scFv-Fc具有特异性狂犬病毒抗原结合活性,相对分子质量为56 000.结论:通过毕赤酵母人抗狂犬病毒抗体scFv-Fc分泌表达文库筛选获得具较高亲和力的新scFv-Fc抗体.
目的:利用畢赤酵母人抗狂犬病毒抗體分泌錶達文庫穫得具特異性狂犬病毒抗原結閤活性的分泌型小分子抗體(scFv-Fc).方法:RT-PCR方法擴增穫得一組輕鏈和重鏈可變區基因.利用重疊延伸PCR方法組裝scFv基因後剋隆入畢赤酵母scFv-Fc抗體庫通用錶達質粒pPICZα/Fc後,電轉化X33酵母菌,甲醇誘導錶達後進行ELISA篩選、基因序列分析及免疫印跡分析.結果:構建瞭抗狂犬病毒畢赤酵母分泌型scFv-Fc庫,穫得瞭12株暘性菌株.對其中2株暘性剋隆進行瞭序列分析證實為新的抗體可變區基因.ELISA、Western blotting分析,證實該scFv-Fc具有特異性狂犬病毒抗原結閤活性,相對分子質量為56 000.結論:通過畢赤酵母人抗狂犬病毒抗體scFv-Fc分泌錶達文庫篩選穫得具較高親和力的新scFv-Fc抗體.
목적:이용필적효모인항광견병독항체분비표체문고획득구특이성광견병독항원결합활성적분비형소분자항체(scFv-Fc).방법:RT-PCR방법확증획득일조경련화중련가변구기인.이용중첩연신PCR방법조장scFv기인후극륭입필적효모scFv-Fc항체고통용표체질립pPICZα/Fc후,전전화X33효모균,갑순유도표체후진행ELISA사선、기인서렬분석급면역인적분석.결과:구건료항광견병독필적효모분비형scFv-Fc고,획득료12주양성균주.대기중2주양성극륭진행료서렬분석증실위신적항체가변구기인.ELISA、Western blotting분석,증실해scFv-Fc구유특이성광견병독항원결합활성,상대분자질량위56 000.결론:통과필적효모인항광견병독항체scFv-Fc분비표체문고사선획득구교고친화력적신scFv-Fc항체.
