蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2012年
1期
97-101
,共5页
王伯阳%姜义仁%臧敏%石生林%杨瑞生%包臣%秦利
王伯暘%薑義仁%臧敏%石生林%楊瑞生%包臣%秦利
왕백양%강의인%장민%석생림%양서생%포신%진리
柞蚕微孢子虫%多克隆抗体%胶体金%免疫层析%双抗夹心法%竞争法
柞蠶微孢子蟲%多剋隆抗體%膠體金%免疫層析%雙抗夾心法%競爭法
작잠미포자충%다극륭항체%효체금%면역층석%쌍항협심법%경쟁법
利用柞蚕微孢子虫孢子液直接免疫家兔获得柞蚕微孢子虫多克隆抗体后,分别采用双抗夹心法和竞争法制作胶体金免疫层析试纸条,建立能简便、快捷、准确诊断柞蚕微粒子病的柞蚕微孢子虫胶体金免疫层析检测法.双抗夹心法和竞争法分别是将柞蚕微孢子虫多克隆抗体与25 nm和17 nm的肢体金颗粒结合并固定在金标垫上,然后均将羊抗兔二抗包被在硝酸纤维素膜上作为质控点(C),但是2种方法制作的胶体金免疫层析试纸条的反应模式不同:前者是以柞蚕微孢子虫多克隆抗体作为检测点(T),而后者以柞蚕微孢子虫孢壁蛋白作为检测点(T).2种方法制作的胶体金免疫层析试纸条的检测时间均为10 min,检测灵敏度为0.8×107个/mL,与柞蚕血淋巴无交叉反应,特异性强,操作简单,其中,以双抗夹心法制作的试纸条显色更清晰,结果更可靠,更具实用价值.
利用柞蠶微孢子蟲孢子液直接免疫傢兔穫得柞蠶微孢子蟲多剋隆抗體後,分彆採用雙抗夾心法和競爭法製作膠體金免疫層析試紙條,建立能簡便、快捷、準確診斷柞蠶微粒子病的柞蠶微孢子蟲膠體金免疫層析檢測法.雙抗夾心法和競爭法分彆是將柞蠶微孢子蟲多剋隆抗體與25 nm和17 nm的肢體金顆粒結閤併固定在金標墊上,然後均將羊抗兔二抗包被在硝痠纖維素膜上作為質控點(C),但是2種方法製作的膠體金免疫層析試紙條的反應模式不同:前者是以柞蠶微孢子蟲多剋隆抗體作為檢測點(T),而後者以柞蠶微孢子蟲孢壁蛋白作為檢測點(T).2種方法製作的膠體金免疫層析試紙條的檢測時間均為10 min,檢測靈敏度為0.8×107箇/mL,與柞蠶血淋巴無交扠反應,特異性彊,操作簡單,其中,以雙抗夾心法製作的試紙條顯色更清晰,結果更可靠,更具實用價值.
이용작잠미포자충포자액직접면역가토획득작잠미포자충다극륭항체후,분별채용쌍항협심법화경쟁법제작효체금면역층석시지조,건립능간편、쾌첩、준학진단작잠미입자병적작잠미포자충효체금면역층석검측법.쌍항협심법화경쟁법분별시장작잠미포자충다극륭항체여25 nm화17 nm적지체금과립결합병고정재금표점상,연후균장양항토이항포피재초산섬유소막상작위질공점(C),단시2충방법제작적효체금면역층석시지조적반응모식불동:전자시이작잠미포자충다극륭항체작위검측점(T),이후자이작잠미포자충포벽단백작위검측점(T).2충방법제작적효체금면역층석시지조적검측시간균위10 min,검측령민도위0.8×107개/mL,여작잠혈림파무교차반응,특이성강,조작간단,기중,이쌍항협심법제작적시지조현색경청석,결과경가고,경구실용개치.
