长江大学学报（自科版）农学卷
長江大學學報（自科版）農學捲
장강대학학보（자과판）농학권
JOURNAL OF YANGTZE UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2012年
3期
34-37
,共4页
鸡传染性贫血%抗原蛋白%原核表达
鷄傳染性貧血%抗原蛋白%原覈錶達
계전염성빈혈%항원단백%원핵표체
根据GenBank上公布的鸡传染性贫血病毒VP1的基因序列设计一系列引物,通过基因扩增得到了鸡传染性贫血病毒(CAV) VP1基因的全长片段和一系列不同N末端截断的VP1基因片段,分别将这些片段插入表达质粒载体pET28a的多克隆位点上,构建成4种重组表达工程菌(E.coli BL21/pET-28-CAVVP1、Ecoli BL21/pET-28-CAVVP1Nd29、E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd56、E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd137),研究了4种不同长度VP1片段在重组大肠杆菌中的表达,并通过SDS-PAGE电泳筛选最佳表达方式.结果表明:E.coli BL21/pET-28-CAVVP1Nd29能表达分子质量为44ku的可溶性蛋白,E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd56能表达分子质量为40ku的不可溶性蛋白,而在E.coli BL21/pET-28-CAV VP1和E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd137的诱导表达产物中未见明显的表达蛋白出现.其中可溶性的CAV VP1Nd29蛋白将有可能用于研制CAV诊断抗原和亚单位疫苗研究.
根據GenBank上公佈的鷄傳染性貧血病毒VP1的基因序列設計一繫列引物,通過基因擴增得到瞭鷄傳染性貧血病毒(CAV) VP1基因的全長片段和一繫列不同N末耑截斷的VP1基因片段,分彆將這些片段插入錶達質粒載體pET28a的多剋隆位點上,構建成4種重組錶達工程菌(E.coli BL21/pET-28-CAVVP1、Ecoli BL21/pET-28-CAVVP1Nd29、E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd56、E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd137),研究瞭4種不同長度VP1片段在重組大腸桿菌中的錶達,併通過SDS-PAGE電泳篩選最佳錶達方式.結果錶明:E.coli BL21/pET-28-CAVVP1Nd29能錶達分子質量為44ku的可溶性蛋白,E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd56能錶達分子質量為40ku的不可溶性蛋白,而在E.coli BL21/pET-28-CAV VP1和E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd137的誘導錶達產物中未見明顯的錶達蛋白齣現.其中可溶性的CAV VP1Nd29蛋白將有可能用于研製CAV診斷抗原和亞單位疫苗研究.
근거GenBank상공포적계전염성빈혈병독VP1적기인서렬설계일계렬인물,통과기인확증득도료계전염성빈혈병독(CAV) VP1기인적전장편단화일계렬불동N말단절단적VP1기인편단,분별장저사편단삽입표체질립재체pET28a적다극륭위점상,구건성4충중조표체공정균(E.coli BL21/pET-28-CAVVP1、Ecoli BL21/pET-28-CAVVP1Nd29、E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd56、E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd137),연구료4충불동장도VP1편단재중조대장간균중적표체,병통과SDS-PAGE전영사선최가표체방식.결과표명:E.coli BL21/pET-28-CAVVP1Nd29능표체분자질량위44ku적가용성단백,E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd56능표체분자질량위40ku적불가용성단백,이재E.coli BL21/pET-28-CAV VP1화E.coli BL21/pET-28-CAV VP1Nd137적유도표체산물중미견명현적표체단백출현.기중가용성적CAV VP1Nd29단백장유가능용우연제CAV진단항원화아단위역묘연구.
