江西医药
江西醫藥
강서의약
JIANGXI MEDICAL JOURNAL
2006年
2期
71-73
,共3页
杨海军%钟文贤%吴晓牧%何丹%陈旻%易敬林
楊海軍%鐘文賢%吳曉牧%何丹%陳旻%易敬林
양해군%종문현%오효목%하단%진민%역경림
胎儿%骨髓%间充质干细胞%细胞培养
胎兒%骨髓%間充質榦細胞%細胞培養
태인%골수%간충질간세포%세포배양
目的探讨胎儿骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的分离和培养条件.方法用DMEM培养液冲洗引产胎儿的骨髓腔,密度梯度离心法分离出其中的单个核细胞后,用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液,将细胞浓度调整到5×105个/ml,接种于12孔培养板中(1 ml/孔),放在37℃、含体积分数为5%的C02的饱和湿度培养箱中培养,48h后更换新鲜培养液,去除未贴壁细胞,以后每3d换液1次继续培养.当细胞铺满培养板底90%以上时,按常规方法进行细胞传代培养.结果原代培养的细胞接种后4h部分细胞开始贴壁,24h大量细胞贴壁并且胞浆伸出突起,变成梭形,培养10～14d后细胞融合成片铺满瓶底;传代培养的细胞1h即可贴壁,4h细胞开始伸展扩大,7～10 d即可铺满瓶底.结论用密度为1.077g/ml淋巴细胞分离液作为分离液,密度梯度离心法分离培养的胎儿骨髓MSCs增殖力强,操作简单,是一种较好的分离和培养MSCs的方法.
目的探討胎兒骨髓間充質榦細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的分離和培養條件.方法用DMEM培養液遲洗引產胎兒的骨髓腔,密度梯度離心法分離齣其中的單箇覈細胞後,用含10%胎牛血清的DMEM/F12培養液,將細胞濃度調整到5×105箇/ml,接種于12孔培養闆中(1 ml/孔),放在37℃、含體積分數為5%的C02的飽和濕度培養箱中培養,48h後更換新鮮培養液,去除未貼壁細胞,以後每3d換液1次繼續培養.噹細胞鋪滿培養闆底90%以上時,按常規方法進行細胞傳代培養.結果原代培養的細胞接種後4h部分細胞開始貼壁,24h大量細胞貼壁併且胞漿伸齣突起,變成梭形,培養10～14d後細胞融閤成片鋪滿瓶底;傳代培養的細胞1h即可貼壁,4h細胞開始伸展擴大,7～10 d即可鋪滿瓶底.結論用密度為1.077g/ml淋巴細胞分離液作為分離液,密度梯度離心法分離培養的胎兒骨髓MSCs增殖力彊,操作簡單,是一種較好的分離和培養MSCs的方法.
목적탐토태인골수간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)적분리화배양조건.방법용DMEM배양액충세인산태인적골수강,밀도제도리심법분리출기중적단개핵세포후,용함10%태우혈청적DMEM/F12배양액,장세포농도조정도5×105개/ml,접충우12공배양판중(1 ml/공),방재37℃、함체적분수위5%적C02적포화습도배양상중배양,48h후경환신선배양액,거제미첩벽세포,이후매3d환액1차계속배양.당세포포만배양판저90%이상시,안상규방법진행세포전대배양.결과원대배양적세포접충후4h부분세포개시첩벽,24h대량세포첩벽병차포장신출돌기,변성사형,배양10～14d후세포융합성편포만병저;전대배양적세포1h즉가첩벽,4h세포개시신전확대,7～10 d즉가포만병저.결론용밀도위1.077g/ml림파세포분리액작위분리액,밀도제도리심법분리배양적태인골수MSCs증식력강,조작간단,시일충교호적분리화배양MSCs적방법.
