CAJ | 학술논문

目的从基因水平人手,筛选DAMGO长期作用后μ-中国仓鼠卵细胞(μ-CHO)差异表达的基因,初步研究阿片类药物与PC12细胞线粒体膜电势之间的关系.方法选用μ受体特异性激动剂DAMGO长期(72 h)作用于μ-CHO细胞,模拟耐受成瘾.利用差异显示PGR、克隆、Northern印迹分析等找出表达水平有改变的基因,测序,并与NIH Blast数据库中序列比对.利用激光共聚焦显微成像、线粒体膜电势测定等方法,观察吗啡短期与长期作用PC12细胞线粒体膜电势的变化.结果其中一条基因在用DAMGO长期刺激μ-CHO细胞后基因水平出现上调,并与大鼠线粒体膜上H+/磷酸基同向转运蛋白编码基因同源性很高.线粒体膜电势测定发现,用10-6～10-4mol/L吗啡短时间(2 h)作用PC12细胞后,细胞内线粒体膜电势部分丧失或完全丧失;长时间(12～60 h)作用后,膜电势出现从部分丧失、完全丧失到逐步恢复的现象,上述现象均能被阿片受体拮抗剂纳洛酮阻断.结论初步提示阿片类药物长期作用含有阿片受体的细胞后,可导致细胞线粒体功能改变,推测阿片类药物可能影响细胞线粒体电子转移、ATP合成过程,此过程可能与阿片类药物长期激活阿片受体导致的成瘾、耐受有关.
목적종기인수평인수,사선DAMGO장기작용후μ-중국창서란세포(μ-CHO)차이표체적기인,초보연구아편류약물여PC12세포선립체막전세지간적관계.방법선용μ수체특이성격동제DAMGO장기(72 h)작용우μ-CHO세포,모의내수성은.이용차이현시PGR、극륭、Northern인적분석등조출표체수평유개변적기인,측서,병여NIH Blast수거고중서렬비대.이용격광공취초현미성상、선립체막전세측정등방법,관찰마배단기여장기작용PC12세포선립체막전세적변화.결과기중일조기인재용DAMGO장기자격μ-CHO세포후기인수평출현상조,병여대서선립체막상H+/린산기동향전운단백편마기인동원성흔고.선립체막전세측정발현,용10-6～10-4mol/L마배단시간(2 h)작용PC12세포후,세포내선립체막전세부분상실혹완전상실;장시간(12～60 h)작용후,막전세출현종부분상실、완전상실도축보회복적현상,상술현상균능피아편수체길항제납락동조단.결론초보제시아편류약물장기작용함유아편수체적세포후,가도치세포선립체공능개변,추측아편류약물가능영향세포선립체전자전이、ATP합성과정,차과정가능여아편류약물장기격활아편수체도치적성은、내수유관.